路爱梅 李洪峥 杨文文 彭煜暄 魏玥 龙霖梓 曲华 吴汉涛 付长庚

    2019年全球疾病负担研究结果表明,以缺血性心脏病和卒中为主的动脉粥样硬化性心血管疾病(atherosclerotic cardiovascular disease, ASCVD)是引起全球人口死亡的首要原因,占全球总死亡人数的三分之一[1],给人类健康带来严重的危害。动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是ASCVD的病理基础,其成因复杂,其中脂质代谢紊乱、免疫和炎症贯穿AS病变始终[2-3]。自噬是在自噬相关基因的调控下,利用溶酶体自我降解后再利用,维持细胞能量稳态的过程[4],对AS的调控更具有双向作用——在AS早期内皮通过自噬调节脂质代谢、减轻炎症反应,从而抑制斑块的形成,晚期随着斑块的进展而变得功能失调[5]。因此,维持自噬的动态平衡对抑制AS的恶性发展极为重要。

    化栓通脉方是本课题组根据临床治疗AS患者总结而来的经验方,用于改善冠状动脉、颈动脉粥样硬化斑块,临床疗效确切。但其在动物体内研究中,是否具有抗AS效应及其作用机制有待进一步研究。有鉴于此,本实验从血清脂蛋白、炎症因子、斑块面积等方面,综合评价化栓通脉方调节ApoE基因敲除(ApoE knockdown, ApoE-/-)小鼠主动脉粥样硬化斑块的效应,并初步探索其是否通过调控自噬而发挥抗AS作用。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及实验环境

    8周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠10只,同品系ApoE-/-小鼠43只,体质量(22±2)g,购于斯贝福(北京)生物技术有限公司[许可证号:SCXK(京)2019-0010]。小鼠饲养于北京了未元医药科技公司动物实验中心[许可证号:SYXK(京)2022-0007],温度(22±2)℃,湿度(50±10)%,明/暗周期(12/12)小时。动物自由进食、饮水。动物伦理审查批号:SYXK2022-0007。

    高脂饲料(83.5%基础饲料+15%猪油+1.5%胆固醇)和普通饲料均由北京华阜康生物科技有限公司[许可证号:SCXK(京)2019-0008]提供。

    实验过程中,动物灌胃致死3只,剔除各组离群值,各组统计数量均为7只。

    1.2 实验药物

    辛伐他汀片(杭州默沙东制药有限公司,规格:20 mg/片,批号:U04517)。化栓通脉方药物组成及剂量:金银花15 g、山楂15 g、鸡血藤15 g、制何首乌15 g、生白芍7.5 g、生甘草4 g ......