刘璐佳 杨阳 景伟超 王有鹏

    全球哮喘倡议报告将支气管哮喘(简称“哮喘”)描述为一种通常以慢性气道炎症为特征的异质性疾病[1]。本病临床以反复发作的呼吸困难、喘息、胸闷和咳嗽等呼吸道症状为主症[2]。据估计,全世界高达14%的儿童和8.6%的成年人患病[3]。目前,哮喘管理的长期目标是实现症状控制、保护肺功能、降低恶化和死亡的风险,以及尽量减少与药物相关的副作用[4],尤其在新型冠状病毒大流行的背景下,哮喘患者必须在良好控制临床症状的情况下继续进行适当的治疗[5]。因此,对于阐明哮喘发病机制,探寻有效防治药物是当前研究的重点。

    人体肠道菌群是一个复杂的生态系统,涉及宿主的新陈代谢、免疫和健康。值得注意的是,新的证据支持肺部疾病通常伴有肠道菌群失调和免疫炎症反应,肠道菌群及其代谢产物直接或间接参与肺病宿主的免疫调节,形成“肺—肠”轴[6]。已有研究表明,肠道菌群失调是导致哮喘和其他呼吸系统疾病的重要因素之一[7-8]。这和中医学上的“肺与大肠相表里”“肺肠相关”理论不谋而合。基于此,笔者所在研究团队首次将分消走泄法引入哮喘的治疗当中,创立了临床有效方剂白果温胆汤治疗哮喘,并于2022年被授予国家发明专利(专利号:ZL202111491708.8)。白果温胆汤以调和为主,分消上下之势,达通利三焦、理气化痰、止咳平喘之效。然目前尚缺乏白果温胆汤干预哮喘作用机制的文献报道,为此本文通过对哮喘模型大鼠肺组织病理形态、粪便肠道菌群进行检测,探讨白果温胆汤的作用机制,为后续进一步研究白果温胆汤提供实验基础。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    72只SPF级雄性SD大鼠体质量(180±20)g,由辽宁长生生物技术有限公司提供,动物许可证号:SCXK(辽)2020-0001。饲养环境安静,光/暗循环12小时,室内温度(25±1)℃,室内湿度45%～55%,自由获取食物和水。

    1.2 实验药物

    白果温胆汤:陈皮18 g、清半夏12 g、茯苓18 g、炒枳实12 g、竹茹12 g、白果12 g、炒葶苈子12 g、射干18 g、浙贝母18 g、炒紫苏子18 g、蜜枇杷叶18 g、浮萍24 g、生甘草12 g,煎煮过滤后,用旋转蒸发仪浓缩成药物浓度5 g/mL,置4℃冰箱中保存备用。

    地塞米松片:天津天药药业股份有限公司,国药准字:H12020686。

    1.3 实验主要试剂和仪器

    OVA(货号:#A8040,北京索莱宝科技有限公司)、氢氧化铝凝胶(货号:S30353,上海源叶生物科技有限公司)、苏木精染料(货号:#G3720,北京索莱宝科技有限公司)、伊红(货号:15086-94-9,山东西亚化工科技有限公司)、4%多聚甲醛(货号:BL539A,广州硕谱生物科技有限公司)、磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline,PBS)(货号:BL302A,广州硕谱生物科技有限公司)、RNA 6000 Nano kit(货号:5067-1511,Agilent)、Agilent High Sensitivity DNA Kit(货号:5067-4626,Agilent)、Quant-iT PicoGreen dsDNA Assay Kit(货号:P7589,Invitrogen)、Q5?High-Fidelity DNA Polymerase(货号:M0491L,NEB)、AxyPrep DNAGel Extraction Kit(货号:AP-GX-250,Axygen) ......