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编号:12058339
酶解-火焰AAS法测定乳制品中的营养元素
http://www.100md.com 2009年1月15日 《中国当代医药》 2009年第2期
酶解-火焰AAS法测定乳制品中的营养元素
酶解-火焰AAS法测定乳制品中的营养元素
酶解-火焰AAS法测定乳制品中的营养元素

     [摘要] 目的:探讨酶解-火焰原子吸收分光光度法(AAS法)测定乳制品中钙、镁、铁、锌4种营养元素的方法。方法:以蛋白酶水解样品,稀酸溶解,经过滤后以火焰AAS法测定。结果:4种元素的平均回收率为90%~102%,相对标准偏差(RSD)小于11%。结论:酶解-火焰AAS法具有操作简单、快速、试验成本低、对人体损害小等优点,与酸消化法相比无显著性差异,适用于乳制品中4种营养元素的测定。

    [关键词] 酶解-火焰AAS法;乳制品;营养元素

    [中图分类号]R115[文献标识码]B [文章编号]1674-4721(2009)01(a)-063-02

    乳制品中的营养元素对恢复、改善和提高人们膳食的营养结构,满足人体需要,维持生命活力,供给机体生长发育的修补材料,维持机体正常的生理机能有重要意义[1]。因此,通过对乳制品中营养元素的分析可以保障人民群众的身体健康。我们采用酶解-火焰原子吸收分光光度法(AAS法)测定乳制品中营养元素,操作简单、快速、试验成本低,现介绍如下。
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    1材料与方法

    1.1仪器与试剂

    美国PE公司PE300原子吸收分光光度计,PE公司钙、镁、铁、锌空心阴极灯;盐酸(优级纯):0.1、0.2、0.5、1.0 mol/L;木瓜蛋白酶(进口分装):4 g/L溶液(现用现配),称取木瓜蛋白酶0.4 g溶解定容至100 ml水中;8-羟基喹宁(分析纯):1 g/L溶液,称取1.0 g溶解于氯化氢(HCl)(1 mol/L)10 ml中,用水稀释定容至1 000 ml;钙(Ca)、镁(Mg)、铁(Fe)、锌(Zn)4种元素标准储备液:1.000 0 mg/ml;二次去离子水。

    1.2工作曲线制作

    取4种元素标准储备液稀释成系列浓度。浓度范围:Ca 0~3.0 μg/ml;Mg、Fe、Zn 0~2.0 μg/ml。Ca用8-羟基喹宁稀释,Mg用HCl(0.2 mol/L)稀释,Fe、Zn用葡萄糖溶液稀释。将仪器按有关参数调整至最佳状态,作出工作曲线或计算直线回归方程。
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    1.3样品的制备与测定

    鲜乳及酸乳取样5.00 g,乳粉取样1.00 g于100 ml烧杯中(用2 ml水调至糊状),加酶液5 ml,混匀,盖表面皿,于40℃恒温箱保温3 h,加HCl(0.2 mol/L,下同)10 ml,摇匀,在40℃下保温2 h,过滤于50 ml容量瓶中,并以HCl分次洗涤烧杯及滤纸上的残渣,经滤纸滤入容量瓶中,以HCl定容,备用。同时做空白实验。

    上述滤液直接用于Fe、Zn的测定;经HCl10倍稀释后测定Mg;以8-羟基喹宁10倍稀释后测定Ca。

    2 结果与讨论

    2.1 实验条件的研究

    2.1.1酶的选择选择胃蛋白酶、胰蛋白酶及木瓜蛋白酶为试验酶,结果发现胃蛋白酶作用2 h各元素原子吸收值达到最大,而同浓度的胰蛋白酶和木瓜蛋白酶则需要3 h,但胃蛋白酶和胰蛋白酶空白液中钙含量较高,因此选择木瓜蛋白酶为试验酶。
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    2.1.2 脂肪对试验的影响乳品中含有一定量的脂肪,为了探讨脂肪对试验结果的影响,先以脂肪酶分解脂肪,再以蛋白酶水解后测定,未见试验值增高。将残渣测定,残渣中的无机元素含量均在检出限以下。说明脂肪对本试验无影响。

    2.1.3 酸度的影响酸的作用是除了使无机元素与有机物充分解离外,还使分子较大的糖类水解便于过滤。在选择HCl的试验中,0.2 mol/L和0.5 mol/L HCl都能使元素的原子吸收值达到最大,但0.5 mol/L HCl使空白液中钙镁浓度增大,故本试验选择0.2 mol/L HCl。

    2.2回收率试验

    对3种样品做回收试验,4种元素回收率在90%~102%。见表1。

    2.3精密度试验

    对3种样品4个元素做6次测定其相对标准偏差均小于11%。见表2。
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    2.4酶解法与酸消化法比较

    用本法与酸消化法[2]对同一份乳品连续进行20次测定,经配对t检验,两法之间差异无统计学意义(t=0.427,t0.05(19)=2.093,P>0.05)。见表3。

    本文报道了酶解-火焰原子吸收法测定乳品中4种营养元素的方法。试验表明:4种元素的平均回收率90%~102%,相对标准偏差(RSD)小于11%。本法具有操作简便快速、试验成本低、对操作人员损害小等优点,适用于乳品中4种营养元素的测定。

    [参考文献]

    [1]中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所编.食品营养成分测定法[M].北京:人民卫生出版社,1990.102.

    [2]中华人民共和国食品卫生检验标准理化部分[S].GB/T5009.101-.203-2003.

    (收稿日期:2008-11-27), http://www.100md.com(李家珂 鲁 彦)