生化检测中的交叉污染与预防
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[摘要] 目的:探讨生化检测中交叉污染的原因及预防方法。方法:研究加样针的交叉污染,运用以下检测方式,混合血清与血清磷;先测血清钙再测血清磷;先测血清氯再测血清磷。结果:测血清钙后再测血清磷对血清磷的测定值有明显影响,测血清氯后再测血清磷则对磷的测定值无明显影响。结论:生化检测的交叉污染主要源于比色杯的交叉污染;搅拌棒的交叉污染;加样针的交叉污染。
[关键词] 生化检测;交叉污染;预防
[中图分类号] R446.11+2 [文献标识码]B [文章编号]1674-4721(2010)04(c)-067-02
近几年,各种生化分析仪逐渐进入各大小医院的检验科,日常检测过程中,生化检测中的交叉污染严重影响生化分析仪的精密度,进而影响检测结果[1-2]。本文围绕生化检测中的交叉污染进行系统分析,并对加样针引起的污染进行实验分析,现报道如下:
1 资料与方法
1.1 仪器与试剂
OLYMPUS AU-400全自动生化分析仪;测钙:偶氮胂Ⅲ(100 μmol/L),磷酸盐缓冲液(50 mmol/L);测氯:硫氰酸贡,硝酸铁;测磷:钼酸铵(0.48 mmol/L),硫酸(220 mmol/L)。
1.2方法
根据试剂的说明书设置仪器的各项参数,实验之前要对仪器实施整体的维护,例如用清洗溶液对比色杯进行全面的清洗,还要清洗搅拌棒和仪器的管道,最后实行仪器光校正。从选定的血清标本中随机抽取几份,即为测试用的混合血清,再把混合血清分成20份,分成3种不同的方式进行实验,同时溶解一瓶室内质控非定值血清(室内质控血清:常规工作中检测项目的精密度水平,是室内质量控制中靶值和允许误差范围确定的依据)。检测方法:①只测混合血清和质控血清磷;②先进行血清钙的测定然后再测定血清磷;③测定血清氯之后测血清磷。
1.3 统计学方法
血清磷测定值以x±s表示,3种测定方式的比较采用配对t检验。
2 结果
先测钙再测磷对磷的测定值有明显影响,差异有统计学意义(P<0.01);而先测氯再测磷则对磷的测定值无明显影响。见表1。
3 讨论
3.1 交叉污染的原因分析
每一种生化分析仪都是共同使用样品吸样针、试剂吸样针,玻璃搅拌棒,因此,当经过很长时间后,生化分析仪的清洗和洗涤作用减弱了,比色杯吸附力加强,日常维护工作欠缺,就导致交叉污染,影响生化分析仪的精密度[3]。
3.1.1 比色杯引起的交叉污染用比色杯检测之后,要对其多次冲洗,然后再进行之后的检测,比色杯上有残留或者吸附力增大时,一定会影响到用这个比色杯进行的下一项检测的结果。
3.1.2 搅拌棒引起的交叉污染搅拌棒冲洗不够彻底,吸附力加强,搅拌棒上的残留,就会影响下一项检测。
3.1.3 加样针引起的交叉污染本文实验中,首先排除了比色杯和搅拌棒产生的交叉污染,血清磷测定值显示的明显偏差就主要源于试剂针。
不管是哪种因素产生的交叉污染,大都是因为前一个样品和试剂对接下来的检测的影响。前一个样品引起的交叉污染不难判定,可以直接从生化分析仪的屏幕上的检测结果来判定。举例说:前一项检测结果很高,接下来的样品在项目一致的情况下检测结果也很高,此时就该分析原因,引起重视。试剂间的交叉污染一般都很复杂,很难判断,因为试剂种类很多,实际说明书又不会很完全地说明试剂的构成[4-5]。由试剂引起的污染,不如样品间的交叉污染那么容易判断,大多是因为样品测试项目的数量不同,影响的程度也不同,当按正规的分析顺序出现反常的结果时,再对各项目进行重复检测,结果是正常的,大部分原因是试剂间的交叉污染[6]。
3.2 交叉污染的预防措施
下面重点探讨一下各类交叉污染的预防措施,功能较强大的仪器,因为样品和试剂的加样针大多是两针和四针的,数目很大,连带有非常繁琐的冲洗步骤;而中、小型仪器加样针的数目很小,冲洗步骤也相对很少,容易残留,携带污染率相对很大。不关联到测试结果的情况下,交叉污染控制在最低程度,这在运用全自动生化分析仪过程中十分重要。工作人员在日常工作中要对仪器做好维护和保养,要严格按照规定来执行(频率具体到1 d、1周、15 d、30 d、6个月、12个月),防止意外状况发生。每日进行检测之前,要仔细查看加样针、搅拌棒、冲洗头部件是否有残留吸附,如果有这种情况,立刻拆解冲洗、擦净;按规定的期限检查比色杯的清洁度;必要时要对其手工冲洗。工作人员一定牢牢掌握生化分析仪的检测过程、项目检测的机制、试剂的构成,经分析后,按照规定较为合理地设置参数和程序,最大限度地排除交叉污染。合理统筹各项目的测试顺序,尽量将容易发生交叉污染的各项隔离开来,也可以在有交叉污染的两项中加入几项非污染的,也可以使生化分析仪内圈和外圈分开,由于仪器和试剂的种数特别多,很难确定好检验的顺序,工作人员要在长期工作中总结出一些可运用的经验,从而提高全自动生化分析仪的精密度,有条件最好使用抗交叉污染的试剂盒。以上问题都符合要求后,交叉污染仍旧无法避免时,就要对仪器的样品加样针、试剂加样针实施特别的清洗,冲洗次数增多,必要时可以加碱液或者酸液,将更好地减弱交叉污染。不过,这样也会使仪器的反应速度大幅度下降。
[参考文献]
[1]李奕才.TMS-1024全自动生化分析仪的交叉污染及处理办法[J].现代检验医学杂志,2005,20(5):121-122 ......
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