虹吸法与离心法制备冷沉淀的质量对比
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[摘要] 目的:通过离心法和虹吸法制备冷沉淀对其质量进行对比,选择合适的冷沉淀制备方法。方法:利用CA-50凝血酶仪检测冷沉淀中FVⅢ和Fg的含量。结果:离心法和虹吸法制备冷沉淀的FVⅢ含量(IU/袋),平均为92.85 IU/袋和81.95 IU/袋,合格率前者为100%,后者为95%,离心法和虹吸法制备冷沉淀FVⅢ含量(IU/袋)的差异有统计学意义(P<0.01);离心法和虹吸法制备冷沉淀Fg的含量(mg/袋)平均为170.95 mg/袋和170.55 mg/袋,合格率均为100%,离心法和虹吸法制备冷沉淀Fg含量(mg/袋)的差异无统计学意义(P>0.01)。结论:冷沉淀的制备方法离心法要优于虹吸法。
[关键词] 冷沉淀;离心法;虹吸法;质量对比
[中图分类号] R943 [文献标识码]C [文章编号]1674-4721(2010)05(a)-149-02
冷沉淀是由新鲜冰冻血浆在1～5℃条件下不溶解的白色沉淀物,是目前临床常用的一种血液成分。目前全国各地血站制备冷沉淀的方法通常有离心法和虹吸法。为比较二者优劣,笔者分别用离心法和虹吸法制备冷沉淀制品各20袋,并进行了质量检测,现将结果报道如下:
1 材料与方法
1.1新鲜冰冻血浆来源
本站制备的200 ml新鲜冰冻血浆,立即放入-50℃以下血浆速冻箱速冻后移至-30℃冷柜中保存。冷冻24 h以上的FFP用于制备冷沉淀[1]。
1.2 仪器和试剂
1.2.1仪器CRYOFUGE6000i大容量冷冻离心机(德国贺利氏),CT-4T.6C型水浴式低温融化箱(美国科瑞特公司),CA-50凝血酶仪。
1.2.2 试剂FVⅢ含量和Fg的含量测定均使用美国菲舍尔-太平洋凝血制品公司生产的凝血酶测定试剂,FVⅢ含量测定试剂批号800-801,有效期2011-07;Fg的含量测定试剂批号600-805,有效期2011-02。
1.3 方法
1.3.1 离心法将联袋新鲜冰冻血浆放入5℃水浴低温融化箱中融化血浆,当血浆基本融化时,取出血浆,3 000 r/min,0℃,15 min离心,分出上清血浆,下层(25±5) ml血浆和白色沉淀物,即为冷沉淀。将其快速置于低温速冻箱内冻结。
1.3.2 虹吸法将联袋新鲜冰冻血浆置于5℃水浴低温融化箱中,另一空袋悬于箱外且位置低于血浆袋。FFP融化时,上清血浆随时被虹吸入空袋中,冷沉淀遗留在FFP袋中。在融化过程中控制水浴温度在5℃,待FFP融化至20～30 ml时,即为冷沉淀。将其快速置于低温速冻箱内冻结。
1.3.3 操作FVⅢ和Fg的检测方法按试剂说明书操作。
1.3.4 质量标准按照GB18469-2001《全血及成分血质量要求》规定,由200 ml FFP制备的冷沉淀(IU):FVⅢ含量≥80 IU/袋,Fg含量≥150 mg/袋,符合质量标准则为合格。
1.4 统计学方法
采用t检验。
2 结果
2.1 两种方法制备冷沉淀FVⅢ含量(IU/袋)检测结果
两种方法制备的冷沉淀FVⅢ(IU/袋)含量检测结果见表1;两种方法制备的冷沉淀Fg(mg/袋)含量检测结果见表2。
2.2 两种方法制备冷沉淀的两种指标合格率比较
离心法和虹吸法制备冷沉淀的FVⅢ含量(IU/袋),平均为92.85 IU/袋和81.95 IU/袋,合格率前者为100%,后者为95%;离心法和虹吸法制备冷沉淀Fg的含量(mg/袋)平均为170.95 mg/袋和170.55 mg/袋,合格率均为100%。
3 讨论
冷沉淀是临床常用的成分血,其中含有大量的第Ⅷ因子和第Ⅴ因子,血管性假血友病因子,纤维蛋白原以及纤维结合蛋白等。由于纯度高、容积小,输注量较大也不会引起循环系统的负荷增加[2]。广泛应用于治疗儿童和成人血友病甲、补充纤维蛋白原、治疗血管性血友病、治疗因子缺乏症和补充纤维结合蛋白等。还常用于促进创伤烧伤愈合、防止伤口感染和阻止DIC扩展,以及用于恶性肿瘤手术和腹腔镜等手术,以减少出血,促进愈合和防止粘连[3]。因此冷沉淀的质量好坏在临床疗效中起到了至关重要作用,选择好的制备方法才能保证为临床提供优质高效的冷沉淀制品。FFP内含有全部的凝血因子,包括不稳定因子Ⅷ,因子Ⅷ在体外的半衰期较短,多为8～12 h,其活性易丧失[4]。离心法制备的冷沉淀FVⅢ的含量和合格率高于虹吸法,差异有统计学意义性;但两种方法制备冷沉淀的Fg含量均为100%的合格率,差异无统计学意义。这是因为虹吸法制备冷沉淀时,一方面因血袋及导管中空气等缘故,通常不能使融化的血浆顺利流入到另一转移空袋,耗时较长,同时在轻挤血袋使血浆转移的过程中导致一部分冷沉淀的流失。另一方面在FFP溶解的过程中,冷沉淀有时不能形成大的凝聚团块,不能聚集吸附在中心未融化的冰块上或袋壁上,由于虹吸作用导致部分流失到另一转移空袋内,从而降低了FVⅢ含量 ......
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