短肽支架纤维对创面表皮碱性成纤维生长因子及表皮细胞生长因子的促进作用(1)
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2010年6月25日
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[摘要] 目的:探讨自组装纤维支架肽RADA16在皮肤烫伤中的治疗作用。方法:在SD大鼠背部以电力机械方法制造深Ⅱ度烧伤模型,对照治疗组以0.9%NaCl溶液代替,烧伤后按时换药,并在不同时间段(伤后7、10、14 d分别取烧伤修复创面的皮肤组织进行免疫组化染色,记录创面碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及表皮细胞生长因子(EGF)的表达,并以图像处理系统软件记录生长因子表达的半定量检测。比较了短肽处理组及空白对照组创面生长因子表达的灰度值。结果:免疫组织化学结果显示,在烧伤修复的不同修复期,短肽处理组bFGF和EGF均明显表达在新生表皮组织中,与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:自组装纤维支架肽对烧伤皮肤生长因子的表达具有促进作用。
[关键词] 成纤维细胞生长因子;表皮细胞生长因子;纳米生物
[中图分类号] R-332 [文献标识码]A [文章编号]1674-4721(2010)06(c)-022-02
bFGF and EGF promotion role of the nano-fibril when it is used on the burn wound
MENG Hui,CHEN Liyan
(University Science and Technology Garden of West China Hospital, Nanometer Biomedical Technology and Membrane Biology Institute,Sichuan Province,Chengdu610041, China)
[Abstract] Objective: To investigate therapeutic effects of self-assembling peptide RADA16-I nanofiber scaffold. Methods: Performed a deep demal partial thickness burn model at the dorsal skin of female Sprague-dawley rats with an electrical scald machine. On the 7th, 10th, 14th day after injury, the wound specimens were removed for immunohistochemical evaluation. Digital photomicrographs of the FGF and EGF-positive tissue were taken and transformed into image analysis software to estimate the intensity of EGF and FGF protein expression with integral optical density. Results: Immunohistochemistry showed the bFGF and EGF were obviously expressed in nascent tissue such as epidermis and glands when wounds were treated with the RADA16-I after injury, comparedthe blank control group ,the difference was statistically significant(P<0.05). Conclusion: There is promoting effect of self-assembling peptide to burnskin growth factor expression.
[Key words] Basic fibroblast growth factor; Epidermic growth factor; Nano-Biology
烧伤伤口护理在伤口愈合中扮演重要的角色,理想的创面敷料应提供一个所有的伤口动态愈合阶段(炎症渗出期,上皮增生期,肉芽组织形成期,瘢痕愈合期)的最佳微环境,实现快速的伤口愈合和功能上和审美上的理想修复。已知在创面愈合过程各阶段生长因子,尤其是碱性成纤维细胞生长因子及表皮细胞生长因子可促进创面上皮化[1-2],协调肉芽组织生长,对防止烧伤延迟愈合造成创面瘢痕修复起到重要作用。本文探讨自组装短肽纤维支架肽RADA16在烧伤创面愈合过程中原位促进创面生长因子的释放作用[3]。
1材料与方法
1.1实验材料
1.1.1自组装肽RADA16 -Ⅰ(PuraMatrixTM, 1%质量/体积,分子理论质量=1 712.9道尔顿)购买自3DM公司(剑桥,麻省)。以纯水稀释成溶液(质量/体积)。1%和0.5%RAD16 -Ⅰ肽在稀释后4℃储存。
1.1.2胶原蛋白(Ⅰ型,鼠尾)Ⅰ型胶原购买自serologicals公司(普莱西德湖,纽约州),其中100 mg胶原蛋白以20 ml 0.02 mol/L乙酸溶解,pH值4.41,购买浓度为5 mg/ml。
1.1.3壳聚糖壳聚糖生物流体敷料购买自浙江医药科技发展公司,中国,pH值2.82,浓度为50 mg/ml。
1.1.4聚乳酸PDLA[聚(DL -乳酸),Sigma公司]使用浓度:10 mg/ml,由聚乳酸粉末溶解。
1.2动物
1.2.1大鼠33只雌性SD大鼠,重250～290 g,购自四川大学临床医学院动物中心实验室。动物饲喂按随意饮食标准饲喂,室内控制温度(22～23℃)和照明(12 h照明和12 h黑暗交替)。动物所有的实验程序按照动物维护与使用条例,合理护理和使用实验动物(美国国立卫生研究院NIH的准则的85-23,1985年出版)。该手术是无菌条件下进行。所有术后动物分别给予50 mg/kg体重氨苄西林,连续3 d,每日1次肌内注射。对动物处死时使用过量麻醉剂实行安乐死 ......
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