IL-17及IFN-γ在溃疡性结肠炎中的表达(1)
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2010年7月5日
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[摘要] 目的:检测Th17类细胞因子IL-17和Th1类细胞因子IFN-γ在溃疡性结肠炎(UC)患者中的表达,以此来探讨溃疡性结肠炎的发病机制。方法:用ELISA法分别检测溃疡性结肠炎患者和正常对照组结肠组织及血单核细胞中IL-17和IFN-γ的表达。结果:UC组结肠组织中IL-17表达较正常对照组显著增加(P<0.05);而UC组结肠组织IFN-γ表达较正常对照组无显著增加(P>0.05);UC组血单核细胞IL-17、IFN-γ表达较正常对照组无显著差异(P>0.05)。结论:局部IL-17升高在UC的发病中可能起重要作用。
[关键词] Th17细胞;Th1细胞;溃疡性结肠炎;IL-17;IFN-γ
[中图分类号] R574.62 [文献标识码]A [文章编号]1674-4721(2010)07(a)-036-02
Expression of IL-17 type cytokine and IFN-γ type cytokine in ulcerative colitis patients
HE Ying,LI Chunming,HOU Fengxue,LIU Yujie
(Department of Digestion,Harbin First Hospital in Heilongjiang Province,Harbin 150010,China)
[Abstract] Objective:Th17 cytokines IL-17 and Th1 type cytokines IFN-γ in ulcerative colitis (UC) patients expressed so as to explore the pathogenesis of ulcerative colitis. Methods:ELISA,were detected in patients with ulcerative colitis and normal colon tissue and the control group blood mononuclear cells of IL-17 and IFN-γ expression.Results:UC Colonic tissue IL-17 expression compared with control group increased significantly (P<0.05);while the UC group colon of IFN-γ expression compared with control group had no significant increase (P>0.05);UC group blood mononuclear cell IL-17,IFN-γ expression compared with control group had no significant difference (P>0.05). Conclusion:Local IL-17 increased in the pathogenesis of UC may play an important role.
[Key words] Th17 cells;Th1 cells;Ulcerative colitis;IL-17;IFN-γ
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一类病因不明的胃肠道慢性非特异性炎症,近年来其发病率不断增加,已成为消化系统常见疾病和慢性腹泻的主要病因[1]。目前大多数研究者认为,该病的发病多与环境、遗传、感染和免疫学因素有关,是一种多基因参与的作用于免疫系统和靶器官的疾病,而免疫学因素在其发病过程中起至关重要的作用[2]。CD4+T细胞是免疫应答的重要效应细胞,本研究通过检测UC患者结肠组织和外周血单核细胞Th17类细胞因子IL-17和Th1类细胞因子IFN-γ的表达,以此来探讨UC的发病机制。
1 资料与方法
1.1 一般资料
UC组选择2008年1月～2009年10月哈尔滨市第一医院门诊及住院确诊为溃疡性结肠炎患者25例,诊断均符合2007年《对我国炎症性肠病诊断治疗规范的共识意见》中的诊断标准[3]。其中,男患12例,女患13例,年龄18～70岁,轻度UC患者7例,中度UC患者14例,重度UC患者4例。对照组10例健康者,对照组与UC组相比年龄、性别构成差异无统计学意义(P>0.05)。
1.2 实验材料
UC组结肠镜下选择病变最显著的肠段结肠组织3块活检,对照组取正常肠组织3块活检,结肠组织均放入液氮罐中保存。另外,UC组和对照组均清晨空腹取外周血。
1.3 主要试剂
IL-17和IFN-γ ELISA试剂盒购自晶美生物工程有限公司;Ficoll-Hypaque分离液为天津市川页生化制品有限公司产品。
1.4 方法
1.4.1 外周血单核细胞(PBMC)培养将血置于抗凝管中,经Ficoll- Hypaque分离液密度梯度离心,得到PBMC。取1×106/ml PBMC将其置于加有10%胎牛血清的RPMI1640培养液中,在37℃、5%CO2条件下培养24 h,取上清液。
1.4.2 ELISA方法检测PBMC中IL-17、IFN-γ严格按照试剂盒说明进行操作,终止反应后在450 nm处读取各孔吸光度值,以各孔OD值为纵坐标,以标准品的浓度为横坐标,绘制标准曲线,根据样品OD值查找对应的浓度。
1.4.3 结肠组织IL-17、IFN-γ测定将取得的结肠标本在含有10 mmol/L DTT的HBSS中清洗15 min,再用HBSS洗净,测湿重,并将其置于加有10%胎牛血清的RPMI1640培养液中,在37℃、5%CO2条件下培养24 h,取上清液,再按ELISA操作说明进行操作 ......
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