当前位置: 首页 > 期刊 > 《中国当代医药》 > 2011年第21期 > 正文
编号:12108033
高效液相色谱法测定桂花中毛蕊花苷的含量
http://www.100md.com 2011年7月25日 丁立新,王心合,杜永祥,柴佳丽
第1页

    参见附件(1757KB,2页)。

     [摘要] 目的:建立HPLC法测定桂花中毛蕊花苷含量的方法。方法:采用ODSC18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.2%冰醋酸溶液(10∶35)为流动相,流速1 ml/min,检测波长为310 nm。结果:该方法线性关系良好,毛蕊花苷平均回收率为99.83%,RSD为0.40%。结论:该方法快速、简便、准确、重现性好,可用于桂花中毛蕊花苷的质量控制。

    [关键词] 桂花;毛蕊花苷;含量测定;高效液相色谱法

    [中图分类号] R927.2 [文献标识码]A[文章编号]1674-4721(2011)07(c)-009-02

    Determination of verbascoside in Osmanthus fragrans by HPLC

    Ding Lixin, WANG Xinhe, DU Yongxiang, CHAI Jiali

    College of Pharmacy, Jiamusi University, Heilongjiang Province, Jiamusi 154007, China

    [Abstract] Objective: To establish a method for determining the verbascoside in Osmanthus fragrans by HPLC. Methods: ODSC18 column (250 mm×4.6 mm, 5 μm) was used. The mobile phase consisted of acetonitrile-0.2% phosphoric acid(1∶3.5). The flow rate was 1.0 ml/min. The detection wavelength was set at 310 nm. Rseults: The linear relation was good. The average recovery of verbascoside was 99.83% with RSD=0.40%. Conclusion: The method is rapid, simple, accurate and has good reproducibility. It can be used for the quality control of the verbascoside in Osmanthus fragrans.

    [Key words] Osmanthus fragrans; Verbascoside; Determinatim; HPLC

    桂花(Osmanthus fragrans)亦称岩桂、九里香、木犀,属木犀科(Oleaceae)木犀属(Osmanthus),是我国特有的常绿阔叶灌木或小乔木经济树种,至今已有2 500多年的栽培史。是我国十大传统名花之一。桂花除了具有很高的观赏价值,还是一种兼药用、食用、香料等多种用途的经济作物。其根、花和果实都可药用除病,性温、味辛、无毒,有化痰、散淤、健脾益肾、舒筋活络的功能。在世界上被称为“全营养食品”[1-4]。

    苯丙素苷化合物(phenylpropanoid glycosides,PPGs)是一类含取代苯乙基和肉桂酰基的天然糖苷,广泛存在于双子叶植物中。近年的研究表明,该类化合物作为药用植物的主要有效成分具有抗菌消炎、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、保肝护肝和碱基修复作用[5-7]。因而日益受到植物化学家、药物学家及有机化学家的重视。本文首次建立了桂花中苯丙素苷化合物毛蕊花苷的HPLC的测定法,旨为桂花的开发利用和质量控制提供一定的实验依据[8-9]。

    1 仪器与试剂

    美国Aglient1100高效液相色谱仪,毛蕊花苷对照品(购自中国药品生物制品检定所),桂花(购于本地药店,经佳木斯大学生药学教研室刘娟教授鉴定),乙腈(色谱纯,天津市科密欧化学试剂有限公司),甲醇(色谱纯,天津市光复精细化工研究所),冰醋酸(分析纯,天津市凯通化学试剂有限公司),水为重蒸馏水,其他试剂均为分析纯。

    2 方法与结果

    2.1 毛蕊花苷提取物的制备

    桂花25 g粉碎后,加入80%乙醇(10倍量),浸泡1 h,在温度为30℃的条件下,超声提取3次,每次20 min,合并提取液,过滤,滤液回收乙醇并浓缩成浸膏。将浸膏加水分散后,用石油醚萃取,取水层,再用乙酸乙酯萃取,回收溶剂,合并滤液,浓缩,得浸膏1.828 g。乙酸乙酯部分进行硅胶拌样后进行常压硅胶柱层析(200~300目),用氯仿:甲醇梯度洗脱。洗脱液浓缩,烘干,得毛蕊花苷样品粉末0.452 7 g。

    2.2 对照品溶液的制备

    精密称取毛蕊花苷对照品2 mg置10 ml容量瓶中,加甲醇溶液溶解并稀释至刻度,再精密吸取1 ml,置10 ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,制成0.02 mg/ml的溶液。

    2.3 供试品溶液的制备

    称取干燥的样品粉末20.13 mg,置10 ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,得到待测液。

    2.4 色谱条件的选择

    色谱柱:ODSC18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈-冰醋酸溶液(1∶3.5)(0.45 μm微孔滤膜滤过,用前超声脱气);检测波长:310 nm;柱温:25℃;流速:1.0 ml/min。在此色谱条件下,精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μl,注入液相色谱仪,测得毛蕊花苷对照品溶液和供试品溶液色谱图,见图1、2。

    2.5 标准曲线的制备

    精密吸取对照品溶液0.25、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 ml,分别置于10 ml容量瓶中,用甲醇定容至刻度,配制成浓度为0.005、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05 mg/ml的对照品溶液。分别取10 μl对照品溶液进样,按上述色谱条件测定色谱峰面积A,以进样量为横坐标,色谱峰面积A为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程:Y=7 779.3X-13.151,r=0.999 7,线性范围为:5~50 μg/ml,见表1、图3。

    2.6 精密度试验

    精密吸取上述对照品贮备液10 μl,重复进样5次,测定毛蕊花苷峰面积值,其RSD为0.48%。测定结果表明本试验精密度符合有关规定。见表2。

    2.7 重复性试验

    取供试品溶液样品5份,按照上述色谱条件操作, RSD为0.46%。测定结果表明重现性良好。见表3。

    2.8 加样回收率试验 ......

您现在查看是摘要介绍页,详见PDF附件(1757KB,2页)