转化生长因子β对成骨细胞增殖\BMP-2及Cbfal基因表达的影响(1)
 |
| 第1页 |
参见附件(2868KB，3页)。
[摘要] 目的：通过转化生长因子β(TGF-β)对体外成骨细胞增殖、骨形态蛋白-2(BMP-2)及核心结合因子1(Cbfal)基因表达的影响，探讨TGF-β对骨代谢影响的可能机制。方法：不同浓度的TGF(0、0.01、100 ng/ml)刺激体外培养的大鼠成骨细胞，采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力，用半定量RT-PCR法检测成骨细胞BMP-2、Cbfal基因的表达。结果：TGF-β可明显促进成骨细胞增殖(P<0.05)，并促进成骨细胞BMP-2、Cbfal基因的表达(P<0.01)，具有浓度依赖性。结论：TGF-β可促进成骨细胞的增殖、分化及成熟，可能是通过增强BMP-2、Cbfal基因的表达来实现的。
[关键词] 转化生长因子β；成骨细胞；增殖；骨形态蛋白-2；核心结合因子-1
[中图分类号] R318[文献标识码]A [文章编号]1674-4721(2011)08(a)-021-03
Effect of transformation growth factor beta (TGF-β) on the proliferation，bone morphogenetic protein-2(BMP-2)and core binding factor al(Cbfal) gene expression in cultured rat osteoblast
WANG Huijuan, DONG Jin
Department of Endocrinolog, The First Clinical Medical College, Shanxi Medical University, Shanxi Province, Taiyuan 030001, China
[Abstract] Objective: To study the effect of TGF-βo n the proliferation, BMP-2 and Cbfal gene expression in rat osteoblast in vitro, discusses the influence of TGF-β on bone metabolism can influence mechanism. Methods: Cultured rat osteoblast were treated with TGF-β in different concentrations (0、0.01、100 ng/ml). Cell proliferation was assessed by MTT, coiorimetric assay, the expression of BMP-2, Cbfal gene in rat osteoblast were examined by semiquantitive RT-PCR.Results: TGF-β could promote osteoblast proliferation (P<0.05) and increase the expression of BMP-2 and Cbfal gene in a does-dependent manner(P<0.01). Conclusion: TGF-β induces the proliferation differentiation and maturity of osteoblast probably by increasing the expression of BMP-2 and Cbfal gene.
[Key words] TGF-β; Osteoblast; Proliferation; BMP-2; Cbfal
TGF-β由一种结构相关的异聚体蛋白组成，是骨组织中含量最丰富的细胞生长因子之一，是骨吸收和骨形成之间有力的调节和偶联因子[1]。TGF-β由成骨细胞产生并以自分泌或旁分泌的形式对成骨细胞的复制和基质的合成起着重要的调节作用。本研究通过观察TGF-β对体外培养的大鼠成骨细胞增殖、BMP-2及Cbfal基因表达的影响，探讨TGF-β对骨代谢影响的可能机制。
1 材料与方法
1.1材料
TGF-β(美国Sigma公司)，DMEM培养基(GIBCO公司)，胎牛血清(杭州四季青生物制剂公司)，Ⅰ型胶原酶(美国Sigma公司)，胰蛋白酶(美国Sigma公司)，寡核苷酸引物，Trirol RNA提取试剂盒，dNTP.M-MLV逆转录，PCRmarker(fermentas)，DNA聚合酶，引物，Beta引物(购于上海生工)，分光光度计(U-2001，HITACHI，日本)，PCR热循环仪(Gene Amp9600，PE公司，美国)，垂直电泳槽(Bio—Rad公司，美国)，电泳仪(Bio—RadPower/PAC200，美国)。
1.2 实验方法
1.2.1成骨细胞的培养采用酶消化法分离并纯化大鼠颅盖骨成骨细胞，计数后以适当密度接种于30 ml培养瓶中，在37℃、5%CO2孵箱中培养，2~3 d换液1次，待细胞达80%~90%汇合时，以2.5 g/L胰蛋白酶消化、传代。
1.2.2 成骨细胞的鉴定取第3代细胞爬片 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(2868KB，3页)。