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编号:12276636
支气管哮喘患儿外周血MIF含量分析(1)
http://www.100md.com 2012年7月15日 《中国当代医药》 2012年第20期
     [摘要] 目的 观察巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在支气管哮喘患儿外周血中的含量及其意义。方法 应用酶联免疫法测定支气管哮喘患儿急性发作期和缓解期以及健康对照组外周血MIF的含量,并对结果进行统计学分析。结果 外周血中MIF的含量:支气管哮喘患儿急性期组明显高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05);支气管哮喘患儿缓解期组明显高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05);支气管哮喘患儿急性期组明显高于缓解期组,差异有统计学意义(P < 0.05)。结论 MIF参与了儿童支气管哮喘的发生、发展等病理生理过程,并与其分期相关。

    [关键词] 儿童;支气管哮喘;巨噬细胞移动抑制因子;酶联免疫法

    [中图分类号] R562.2+5 [文献标识码] B [文章编号] 1674-4721(2012)07(b)-0112-02

    Analysis of serum MIF content levels in children with asthma
, 百拇医药
    ZHANG Aiping SONG Yu'e SONG Dongmei

    First Affiliated Hospital of Baotou Medical College in Nei Monggol Autonomous Region, Baotou 014010, China

    [Abstract] Objective To investigate the serum levels of MIF in children with asthma and its significance. Methods MIF expression in peripheral blood of 100 cases of children with asthma (asthma group) and 30 healthy controls (control group) were determined by ELISA. And the result was analyzed statistically. Results Content of MIF in the peripheral blood in asthma group was significantly higher than that in control group (P﹤0.05), and MIF of catabatic period was also higher than that of control group,MIF in acute period was significantly higher than catabatic period (P﹤0.05). Conclusion MIF may involve the pathological physiology process of occurrence, development of bronchial asthma, and relates with its stage.
, 百拇医药
    [Key words] Child; Bronchial asthma; MIF; Enzyme linked immunosorbent assays

    近年来相关研究表明支气管哮喘发病率呈逐年上升的趋势,它已经成为一个日趋严重且不可忽视的全球性卫生问题。目前全世界大约有3亿人患支气管哮喘,其中儿童患者就有1.5亿,占全球人口的5%。支气管哮喘作为儿科最常见疾病之一,严重地影响了儿童的生长发育和身心健康,一部分儿童哮喘还可迁延至成人哮喘,对患儿家庭和社会产生巨大的经济负担和精神压力。支气管哮喘为多种炎症细胞(特别是肥大细胞、嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞)参与、有多种炎症介质介导的、并与遗传和环境等多种因素相关的慢性气道炎症反应。其发病机制极为复杂, 在哮喘复杂的细胞因子网络中,MIF(巨噬细胞移动抑制因子)起着关键作用,MIF是一种高度多变的蛋白质,它既是一种前炎症因子、神经内分泌激素和酶,同时还可以作为糖皮质激素生理活动的负反馈调节剂。本研究通过测定外周血MIF的含量,来探讨其在儿童支气管哮喘发病机制中的可能作用,并评价其反应儿童支气管哮喘气道炎症的严重性以及临床分期的临床价值。
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    1 资料与方法

    1.1 一般资料

    1.1.1 病例组 选取100例2009年11月~2011年12月在内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院儿科门诊及病房治疗的支气管哮喘急性发作期患者作为急性期患者,其中,男56例,女44例,平均年龄(3.7±2.5)岁;选取50例缓解期患者,男23例,女27例,平均年龄(4.27±3.20)岁。

    入选标准:符合2008年中华医学会儿科学分会呼吸学组制定的哮喘诊断标准,年龄0~14岁,不伴其他感染性及免疫性疾病。且所有急性期患者近4个月内未使用过激素和免疫调节剂。

    1.1.2 正常对照组 对照组30例患者,均为在内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院儿科门诊健康体检的儿童。男15例,女15例,平均年龄(3.9±2.4)岁。体格检查正常,无湿疹、过敏性鼻炎等免疫性疾病史及相关疾病家族史。近1个月无上呼吸道感染性疾病,与病例组间年龄、性别差异均无统计学意义(P > 0.05)。
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    1.2 实验方法

    1.2.1 标本采集及保存 急性发作期患者、缓解期患者(指导其规律雾化吸入糖皮质激素40 d后)和对照组分别留取空腹静脉血2 mL,1 500 r/min离心10 min,分别提取上层血清,分装至200 μL EP管中,置于-70℃冰箱保存。

    1.2.2 测定步骤 MIF检测试剂盒购买于美国R&D System公司,采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked imunosorbent assay,ELISA)测定。(1)从冰箱内取出待测样品,平衡至室温。(2)取出试剂盒,室温放置30 min。(3)取出酶标板依次编号,并设空白孔和标准品孔。(4)加样:①空白孔不加样品,生物素标记的抗MIF抗体,链霉亲和素-HRP,只加显色剂A&B和终止液,其余各步操作相同;②标准品孔,加入标准品50 μL,链霉素-HRP 50 μL;③待测样品孔:加入样本40 μL,然后加入抗-MIF抗体10 μL、链霉素-HRP 50 μL,盖上封板膜,轻轻振荡混匀,37℃温育60 min。(5)配液:将30倍的浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。(6)洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 s后弃去,如此重复5次,拍干。(7)显色:每孔加入显色剂A 50 μL,再加入显色剂B 50 μL,轻轻振荡混匀,37℃避光显色10 min。(8)终止:每孔加入终止液50 μL,终止反应(此时蓝色转为黄色)。(9)测定:以空白孔调零,450 nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定在加终止液后10 min内进行。, 百拇医药(张爱平 宋玉娥 宋冬梅)
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