帕瑞昔布对大鼠急性痛及血小板CD62p水平的影响
 |
| 第1页 |
参见附件。
[摘要] 目的 研究帕瑞昔布对大鼠急性痛及血小板CD62p的影响。 方法 将48只SD大鼠随机分为4组(C1、P1、C2、P2)，每组12只，其中P1、P2组分别在造模前30 min和造模后30 min经尾静脉注射帕瑞昔布10 mg/kg，C1、C2组分别在造模前30 min和造模后30 min经尾静脉注射等量0.9%氯化钠溶液。于造模前1 d和造模后6 h对各组进行热板实验，统计后肢回缩时间(PWL)来观察造模前后使用帕瑞昔布对大鼠急性痛的影响。并在造模前1 d和造模后6 h热板实验后采眼眶静脉血检测血小板CD62p水平。 结果 与C1、C2组比较，P1、P2组的PWL均分别增高，P1组的PWL值也高于P2组。造模后血小板CD62p水平高于造模前，而组间CD62p水平比较差异无统计学意义。 结论 帕瑞昔布能减轻急性疼痛，而疼痛刺激前使用帕瑞昔布的镇痛效果更佳。同时帕瑞昔布对血小板水平无明显影响。
[关键词] 大鼠；急性痛；帕瑞昔布；CD62p
[中图分类号] R614 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2012)12(c)-0084-02
非甾体类抗炎镇痛药在超前镇痛方面的使用日益受到重视，其通过抑制环氧化酶减少花生四烯酸转化成前列腺素等炎性介质，达到抗炎镇痛的效果，但大部分NSAID类药物对胃肠道、肾脏、血小板等的不良反应而限制了其临床使用。帕瑞昔布是第一种可静脉注射的高选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂，降低了以往NSAID不良反应的发生率。本研究通过观察帕瑞昔布对大鼠急性痛在超前镇痛方面的作用及其对大鼠体内血小板CD62p的影响，为其在临床中安全应用提供实验室依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物与分组
1.2 大鼠急性痛模型制备
用3%七氟醚麻醉大鼠后，按Brennan法[1]，消毒其右后足，从足底近端0.5 cm向趾部切开一1 cm的切口，挑起足底肌肉作纵向切割，保持肌肉附着点不损伤，止血后用4号丝线缝合皮肤，完成急性痛模型。
1.3 痛阈测定
采用热板实验测定大鼠疼痛阈值[2]。将不锈钢杯置于(55.0±0.5)℃的恒温水浴槽(型号HSC-800，南京安奈实验设备有限公司)。大鼠放入杯中，从右后肢接触到出现踮脚、回缩、舔足、挣扎任一动作的时间计为后肢回缩时间(paw withdrawal latency，PWL)，作为后肢痛阈指标。测量3遍，每次时间<40 s，间隔10 min，取其平均值。每只大鼠在用药前1 d测定热痛阈潜伏期作为基础热痛阈值，于术后6 h再进行测定。
1.4 血小板CD62p测定
分别于造模前1 d和痛阈测定后在七氟醚麻醉下采大鼠眼眶静脉血2 mL，以2% EDTA(乙二氨四己酸)1∶9抗凝，离心(800 r/min)5 min，取上层血清即为RPS。调整血小板浓度为300×109/L，加入20 μL血小板单克隆荧光抗体(immunototech公司)，避光反应30 min，离心(2 000 r/min)15 min，以磷酸缓冲液(PBS)2 mL漂洗，同速离心1次，丢弃上清，最后加入PBS 500 μL放入流式细胞仪 (FACScan型，美国BD公司)检测[3]。
1.5 统计学处理
3 讨论
近年来的研究表明，外周敏化和中枢敏化过程在疼痛的发生机制中起着重要作用[4-5]。外周敏化是在组织损伤和炎症反应时，受损部位的细胞如肥大细胞、巨噬细胞和淋巴细胞等释放多种炎症介质。同时，伤害性刺激本身也可导致神经源性炎症反应，进一步促进炎症介质释放。这些因素使平时低强度的阈下刺激也可导致疼痛。外周敏化发生后可表现为：(1)静息疼痛或自发性疼痛：指在无外周伤害性刺激情况下所产生的痛觉，系由外周伤害性感受器自主激活所致；(2)原发性痛觉过敏：尽管疼痛刺激轻微，但疼痛反应剧烈；(3)异常疼痛：受非伤害性刺激如轻压时即可引起疼痛。中枢敏化是指组织损伤后，不仅受损伤区域对正常的无害性刺激反应增强，邻近部位未损伤区对机械刺激的反应也增强。这是因疼痛发生后，中枢神经系统发生可塑性变化，脊髓背角神经元兴奋性增强，呈现“止扬”效应。帕瑞昔布静脉注射后可迅速被肝脏水解成伐地昔布，后者可通过抑制中枢和外周COX-2表达，减少中枢和外周PG合成，从而发挥镇痛抗炎作用的同时减弱有害刺激引起的中枢和外周的敏感化达到超前镇痛的作用。本研究也证实，使用帕瑞昔布静脉注射能提供很好的镇痛作用，与对照组相比，无论术前还是术后使用帕瑞昔布，其镇痛作用都是显著的。而术前预先注射的效果明显优于术后。
除镇痛方面的效果，与传统的非甾体类镇痛药相比，帕瑞昔布有更好的安全性。这主要归功于帕瑞昔布对COX-2具有高选择性[6]，从而减低了抑制COX-1所带来的不良反应。COX-1和COX-2是同工酶，其中COX-1为要素性蛋白，它是维持人体生理需要的要素酶，可促进生理需要的PGs合成，调节外周血管阻力，维持肾血流，保护胃黏膜及调节血小板聚集。而COX-2为诱导性蛋白，只有在炎症刺激时才大量产生，进而促进组织合成大量致炎性PGs，引起组织的炎性反应，并引起疼痛。血小板本身不含有COX-2，其血栓素的合成是由COX-1介导的，而血小板正常活化在机体出凝血方面发挥重要作用[7]。因此帕瑞昔布对血小板的功能无影响，也不干扰机体正常的出凝血功能[8]。本研究通过测定血小板CD62p水平也证实了帕瑞昔布这种特性。
因此，帕瑞昔布不仅能提供良好的镇痛作用，尤其在超前镇痛方面效果显著，而且能避免传统非甾体类药物对血小板功能的影响。其在临床上的使用具有更高的安全性及更广的适用范围。
[参考文献]
[1] Brennan TJ，Vandermeulen EP，Gebhart GF. Characterization of a rat model of incisional pain[J]. Pain，1996，64(3)：493-501.
[2] 王擒云，杨建平，张慧娟. 延髓头端腹内侧核GABA受体在异丙酚致大鼠痛觉过敏中的作用[J]. 中华麻醉学杂志，2010，30(1)：142-144.
[3] 邓小燕，周颖仪，冯桂玲，等. 汇集血小板聚集功能与CD62P的相关研究[J] ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(2069kb)。