甲醛固定的不同组织中DNA提取的比较
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2013年7月15日
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曹晨 刘彦军 郑文 薛淑莲 杜秋香 孙俊红 王英元 山西医科大学法医学院;山西省运城市公安局刑事技术支队;山西医科大学公共卫生学院;
【摘要】目的研究运用改良酚-氯仿法从甲醛固定组织中提取DNA的方法,对比心、肝、肺、脑4种脏器DNA提取质量的优劣,从而了解哪种经甲醛固定后的组织易于得到质量较为可靠的DNA,以达到对DNA扩增及后续研究的目的。方法选取甲醛固定标本脏器各14例,以蛋白酶K消化和酚-氯仿法提取检材中DNA,对所得DNA质量以紫外分光光度计、PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析进行结果判断。结果心、肝、肺、脑4种组织所提DNA的OD_(260)/OD_(280)比值分别为(1.842±0.380)、(1.861±0.076)、(1.387±0.113)、(1.428±0.087)。每100毫克组织中DNA含量(μg)分别为(0.944±0.530)、(1.096±0.544)、(0.348±0.273)、(0.601±0.238)。PCR扩增后经琼脂糖凝胶电泳分析显示,心肌和肝脏组织的条带清晰度高于肺脏和脑组织。结论经甲醛浸泡固定的心肌组织和肝脏组织,运用改良酚-氯仿法所得DNA质量较为可靠,可以用于后续研究。
【关键词】 法医病理学 甲醛固定 改良酚一氯仿法 DNA提取
【分类号】D919
检材中DNA的提取是法医学中常用的一项技术，同时也是分子生物学中研究基因功能的重要步骤l’}。目前，从新鲜组织中提取高质量DNA的技术已经比较成熟，但由于某些疾病的新鲜标本获取较为困难，使通过新鲜组织进仃DNA水平的研究相对受限。在国内，儿乎所有的医院及司法鉴定机
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