小鼠最大灌胃量的研究(2)
1.4.2 PEG6000溶液灌胃后对小鼠心脏的影响 取SD健康小鼠150只，随机分为实验组和对照组。实验组用20 g/100 ml、40 g/100 ml的PEG6000溶液灌胃，灌胃剂量为0.6 ml/20 g、1.0 ml/20 g、1.4 ml/20 g，对照组以相同剂量的生理盐水灌胃。各组小鼠用乌拉坦麻醉后仰卧固定，待稳定后记录灌胃后2、4、6、8、10 min的心电图。观察并比较两组心电图的变化。
1.4.3 小鼠心脏的病理切片观察 心电图记录完毕后放血处死小鼠，取心脏组织标本，用4%中性甲醛固定，按病理检验程序进行，常规石蜡包埋，切片，5 μm，HE染色，光学显微镜观察。
1.5 统计学处理
采用SPSS 11.0统计软件对数据进行分析和处理，计量资料以x±s表示，采用方差分析，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 生理情况下小鼠体重与灌胃体积的关系
灌胃体积随小鼠体重的增加而增加，趋势逐渐变缓，而且在一定的体重范围内灌胃体积与小鼠体重呈线性关系，线性方程为：y=0.0836x-0.6161，r=0.9598(图1)。
图1 生理情况下小鼠体重与灌胃体积的关系
A.变化趋势曲线；B.线性关系曲线
2.2 PEG6000溶液灌胃后小鼠心电图的变化
不同浓度PEG6000灌胃后，与其相同灌胃剂量的空白组比较，心电图的T波变化值差异无统计学意义(P>0.05)(表1)。
2.3 心肌组织病理学结果
光镜观察心肌组织的病理学改变，不同浓度PEG6000灌胃后，与其相同灌胃剂量的空白组的心肌组织比较，未见组织病理学改变(图2)。
3 讨论
考察药物的黏稠度、小鼠胃容量对小鼠生理指标、组织的影响而确定一个可以普遍适用的灌胃体积数值十分必要[13-16]。若灌胃量偏小，达不到预期给药剂量；灌胃体积过大并超过胃内最大容积，重则小鼠死亡，轻则药液会沿着针管流出食道，甚至溢出口腔，不仅会使进入胃中的实际药量减少，而且过度舒张的胃壁会刺激并兴奋迷走神经，从而对心脏产生抑制作用，造成小鼠的心电图发生变化，心肌组织发生改变，影响药物特别是心血管疾病药物的药理药效实验结果。对小鼠最大灌胃量问题的考察与研究是药理药效研究的基础性工作，若不能准确把握给药体积，后续实验的准确性和重复性将难以实现[17-20]。
通常情况下，不同体重小鼠间的灌胃量是根据小鼠的体重比值进行换算。通过本实验生理情况下小鼠最大灌胃容量的测定，确认在一定的小鼠体重范围内，灌胃量和小鼠体重存在一定的线性关系，因此确定某一体重小鼠的最大灌胃容量后，可根据不同小鼠的体重情况按线性关系加以调整。
不同浓度的PEG6000溶液，黏稠度不同。本实验可知，与空白组比较，相同灌胃量的不同浓度PEG6000溶液灌胃后对小鼠心电图T波变化的影响差异无统计学意义(P>0.05)，心肌组织病理切片也未见改变。在进行药理药效研究时，对于有一定黏稠度的制剂，尽可能提高药物浓度，可达到最大给药量。
[参考文献]
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[4] 郭洁，张晓双.特效风湿宁胶囊小鼠灌胃急性毒性试验[J].陕西中医，2012，33(9)：1251-1252.
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[12] 蒋平，杨阳，孙阳，等.养胃颗粒灌胃给药对小鼠的急性毒性实验[J].时珍国医国药，2014，25(4)：841-843.
[13] 张杰，孙敏捷，平其能，等.芒果苷-磷脂复合物的油制剂在大鼠灌胃后的生物利用度[J].中国新药杂志，2014， 23(9)：1092-1098.
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[15] 唐跃年，张健，陆晓彤，等.射干合剂灌胃后大鼠尿及粪便中6 种成分含量[J].医药导报，2014，33(8)：985-987.
[16] 石骁昵，张俊.番茄酱灌胃大鼠粪便中番茄红素的提取工艺研究[J].新疆医科大学学报，2014，37(9)：1155-1158.
[17] 施新猷.医用实验动物学[M].西安：陕西科学技术出版社，1989：415-416.
[18] 徐叔云，卞如濂，陈修，等.药理实验方法学[M].2版.北京：人民卫生出版社，1991：156-167.
[19] 陈奇.中药药理研究方法学[M].2版.北京：人民卫生出版社，2006：108.
[20] 谢秀琼，张世臣.中药新制剂开发与应用[M].3版.北京：人民卫生出版社，2006：742.
(收稿日期：2014-08-29 本文编辑：李亚聪) (鄢海燕等)
1.4.3 小鼠心脏的病理切片观察 心电图记录完毕后放血处死小鼠，取心脏组织标本，用4%中性甲醛固定，按病理检验程序进行，常规石蜡包埋，切片，5 μm，HE染色，光学显微镜观察。
1.5 统计学处理
采用SPSS 11.0统计软件对数据进行分析和处理，计量资料以x±s表示，采用方差分析，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 生理情况下小鼠体重与灌胃体积的关系
灌胃体积随小鼠体重的增加而增加，趋势逐渐变缓，而且在一定的体重范围内灌胃体积与小鼠体重呈线性关系，线性方程为：y=0.0836x-0.6161，r=0.9598(图1)。
图1 生理情况下小鼠体重与灌胃体积的关系
A.变化趋势曲线；B.线性关系曲线
2.2 PEG6000溶液灌胃后小鼠心电图的变化
不同浓度PEG6000灌胃后，与其相同灌胃剂量的空白组比较，心电图的T波变化值差异无统计学意义(P>0.05)(表1)。
2.3 心肌组织病理学结果
光镜观察心肌组织的病理学改变，不同浓度PEG6000灌胃后，与其相同灌胃剂量的空白组的心肌组织比较，未见组织病理学改变(图2)。
3 讨论
考察药物的黏稠度、小鼠胃容量对小鼠生理指标、组织的影响而确定一个可以普遍适用的灌胃体积数值十分必要[13-16]。若灌胃量偏小，达不到预期给药剂量；灌胃体积过大并超过胃内最大容积，重则小鼠死亡，轻则药液会沿着针管流出食道，甚至溢出口腔，不仅会使进入胃中的实际药量减少，而且过度舒张的胃壁会刺激并兴奋迷走神经，从而对心脏产生抑制作用，造成小鼠的心电图发生变化，心肌组织发生改变，影响药物特别是心血管疾病药物的药理药效实验结果。对小鼠最大灌胃量问题的考察与研究是药理药效研究的基础性工作，若不能准确把握给药体积，后续实验的准确性和重复性将难以实现[17-20]。
通常情况下，不同体重小鼠间的灌胃量是根据小鼠的体重比值进行换算。通过本实验生理情况下小鼠最大灌胃容量的测定，确认在一定的小鼠体重范围内，灌胃量和小鼠体重存在一定的线性关系，因此确定某一体重小鼠的最大灌胃容量后，可根据不同小鼠的体重情况按线性关系加以调整。
不同浓度的PEG6000溶液，黏稠度不同。本实验可知，与空白组比较，相同灌胃量的不同浓度PEG6000溶液灌胃后对小鼠心电图T波变化的影响差异无统计学意义(P>0.05)，心肌组织病理切片也未见改变。在进行药理药效研究时，对于有一定黏稠度的制剂，尽可能提高药物浓度，可达到最大给药量。
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[10] 吴翠萍，李彦，卜文，等.哺乳期大鼠灌胃给药技术方法探讨[J].中国药理学与毒理学杂志，2013，27(3)：540.
[11] 刘庆庆，任文瑾，吕娇，等.花椒精灌胃剂量对去势大鼠肠道健康的影响[J].食品科学，2013，34(17)：241-245.
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[13] 张杰，孙敏捷，平其能，等.芒果苷-磷脂复合物的油制剂在大鼠灌胃后的生物利用度[J].中国新药杂志，2014， 23(9)：1092-1098.
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[16] 石骁昵，张俊.番茄酱灌胃大鼠粪便中番茄红素的提取工艺研究[J].新疆医科大学学报，2014，37(9)：1155-1158.
[17] 施新猷.医用实验动物学[M].西安：陕西科学技术出版社，1989：415-416.
[18] 徐叔云，卞如濂，陈修，等.药理实验方法学[M].2版.北京：人民卫生出版社，1991：156-167.
[19] 陈奇.中药药理研究方法学[M].2版.北京：人民卫生出版社，2006：108.
[20] 谢秀琼，张世臣.中药新制剂开发与应用[M].3版.北京：人民卫生出版社，2006：742.
(收稿日期：2014-08-29 本文编辑：李亚聪) (鄢海燕等)