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编号:12575539
T—SPOT对青少年结核病诊断价值的研究(2)
http://www.100md.com 2015年9月25日 中国当代医药2015年第27期
     如果存在阳性对照无反应即说明受检对象的细胞免疫功能可能存在一定的减退,如果阴性对照出现阳性结果,那么可能存在操作不当所致的污染或者是机体处于某种病毒急性感染的状态(如流感或者急性肝炎导致IFN-γ大量产生)。

    1.3 实验步骤

    用8 ml肝素钠抗凝真空采血管采集患者外周静脉血,加入Ficoll淋巴细胞分离液中18~25℃,1600×g,离心28 min。用吸液管吸取白色、云雾状PBMCs层并转移至15 ml尖底离心管中,加入RPMI 1640细胞培养液至10 ml。600×g离心7 min,弃去上清液用1 ml培养液重悬沉淀。加RPMI 1640细胞培养液至10 ml,350×g离心7 min,弃去上清液加350 μl AIM-V 培养液重悬沉淀。每个患者样本使用4个检测孔,每个检测孔加入100 μl细胞终溶液(含有25万个活细胞)

    1.4 统计学分析

    采用SPSS 20.0统计软件包进行数据分析,计数资料比较采用χ2检验和Kappa一致性检验 ......
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