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编号:12856337
PM2.5对肝细胞脂质代谢和氧化应激的影响(2)
http://www.100md.com 2016年3月25日 《中国当代医药》 2016年第9期
     1.2 指标与方法

    1.2.1 CCK-8法检测PM2.5对肝细胞的毒性 取对数生长期的L02细胞,加入96孔板中,以终浓度6.25、12.50、25.00、50.00和100.00 μg/ml的PM2.5对肝细胞染毒,另设阴性对照组,每组设6个复孔,36 h后按说明书步骤测定细胞吸光度,计算细胞存活率。细胞存活率(%)=(实验组OD值/阴性对照组OD值)×100%。

    1.2.2 胞内脂质含量测定 根据CCK-8结果选取6.25、12.50和25.00 μg/ml三个浓度的PM2.5对L02细胞染毒,另设阴性对照组。36 h后收集细胞,PBS洗涤两次,取细胞裂解液,按说明书检测总胆固醇和三酰甘油的浓度。

    1.2.3 LXRα和SREBP-1c基因表达检测 同步骤1.2.2分组和染毒,提取总RNA,按说明书用定量PCR检测两者的表达。LXRα上游引物:5′-TCA GAG AGG AAG CCA GGA TG-3′,下游引物:ACG GAT CTC TGT GGG TTC TG;SREBP-1c;上游引物:5′-CGA CAT CGA AGA CAT GCT TCA G-3′ ......
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