1.6.2 精密度 随机抽取2块包被后的板，取一批已知浓度110 μg/ml的rhNGF蛋白溶液，在规定范围内根据测定结果进行评价。分别取稀释蛋白含量为10、50、100 ng/ml浓度的供试品溶液各1份，按ELISA检测试剂盒检测步骤进行6次独立试验。计算每次测定结果，求出均值(x)、标准差(s)和相对标准偏差(RSD)。

    1.6.3 检测敏感度 根据上述实验操作结果计算本试剂盒的检测敏感度。

    2 结果

    2.1 杂交瘤细胞株的建立

    选取的5只小鼠经重组人神经生长因子连续3次免疫后，尾部取血测定每只小鼠血清效价。图1结果显示，5只免疫小鼠的血清效价有明显差异，其中2#小鼠的血清效价最高，选取其进行细胞融合试验。

    图1 免疫的5只小鼠血清效价图

    所选小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合处理后，采用间接ELISA法检测，选出阳性值较高的融合细胞；采用有限稀释法对阳性杂交瘤细胞进行克隆化，共获得13株杂交瘤细胞；采用体内诱生法大量制备单克隆抗体，将所得的13份纯化抗体进行筛选，最终获得高效稳定分泌抗hNGF单克隆抗体的杂交瘤细胞株6G3可用于检测试剂盒的建立 ......