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编号:12960456
IL—9在溃疡性结肠炎患者结肠黏膜中的表达及意义(2)
http://www.100md.com 2016年7月15日 《中国当代医药》2016年第20期
     1.2.2免疫组织化学染色 所有标本均经常规石蜡包埋,4 μm厚连续切片常规脱蜡水化,高压锅枸橼酸盐缓冲液热修复抗原,室温下滴加3%过氧化氢阻断内源性过氧化物酶活性,滴加兔抗人IL-9抗体(1∶400)后冰箱4℃过夜,滴加二抗后于室温下孵育15 min,DAB显色,苏木素复染,经梯度酒精脱水干燥,二甲苯透明,中性树胶封片。兔抗人IL-9多克隆抗体购自艾博抗(上海)贸易有限公司,即用型快速免疫组化MaxVisionTM试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司。

    1.3评价标准

    免疫组织化学判定标准:IL-9定位于胞浆和(或)胞膜,分别对镜下阳性细胞的百分数和染色强度给予评分。①阳性细胞百分数:每张切片上观察5个高倍镜视野(×200),计数阳性细胞百分比,阳性细胞百分比≤5%为0分,6%~25%为1分,26%~50%为2分,51%~75%为3分,>75%为4分;②着色程度:无着色为0分,浅黄色为1分,棕黄色为2分,棕褐色为3分。两者相乘,乘积≤4为阴性表达(-),>4为阳性表达(+) ......
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