呼吸道感染流感嗜血杆菌生物学分型及耐药基因研究(2)
1材料与方法
1.1材料
2015年1月～2016年12月从惠东县人民医院门诊及住院患者呼吸道标本，包括痰液、咽拭子、肺部灌洗液分离获得的Hi共200株(剔除来自同一患者相同部位的分离菌株)。
1.2 Hi鉴定及生物型分型
根据全国临床检验操作规程，将合格送检标本分别接种于哥伦比亚血平板及含有万古霉素的巧克力平板(梅里埃嗜血杆菌巧克力平板)上，孵育条件：37℃，5%CO2，18～24 h。然后从中挑取无色、透明、湿润小菌落，在血琼脂平皿(广州市迪景微生物科技有限公司)和营养琼脂平皿(郑州博赛生物技术股份有限公司)上用ATCC25923(金黄色葡萄球菌)进行卫星试验，在血琼脂平皿上生长而在营养琼脂上无菌落生长者，初步鉴定为Hi。再用法国梅里埃系统API NH进行鉴定确认(根据API NH中脲酶发酵、吲哚试验和鸟氨酸脱羧酶发酵三个生化反应进行Hi生物分型)，并同时检测β-内酰胺酶(梅里埃β-内酰胺酶快速检测试剂盒)。
1.3 药敏试验
采用K-B纸片扩散法，按2014年美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准取0.5麦氏单位Hi菌悬液涂布于Hi专用药敏培养基HTM(Hemophilustestmedium，美国OXOD公司)，贴上抗生素纸片，5%CO2、35～37℃培养18～24 h后测量抑菌圈直径并判读结果 ......
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1.1材料
2015年1月～2016年12月从惠东县人民医院门诊及住院患者呼吸道标本，包括痰液、咽拭子、肺部灌洗液分离获得的Hi共200株(剔除来自同一患者相同部位的分离菌株)。
1.2 Hi鉴定及生物型分型
根据全国临床检验操作规程，将合格送检标本分别接种于哥伦比亚血平板及含有万古霉素的巧克力平板(梅里埃嗜血杆菌巧克力平板)上，孵育条件：37℃，5%CO2，18～24 h。然后从中挑取无色、透明、湿润小菌落，在血琼脂平皿(广州市迪景微生物科技有限公司)和营养琼脂平皿(郑州博赛生物技术股份有限公司)上用ATCC25923(金黄色葡萄球菌)进行卫星试验，在血琼脂平皿上生长而在营养琼脂上无菌落生长者，初步鉴定为Hi。再用法国梅里埃系统API NH进行鉴定确认(根据API NH中脲酶发酵、吲哚试验和鸟氨酸脱羧酶发酵三个生化反应进行Hi生物分型)，并同时检测β-内酰胺酶(梅里埃β-内酰胺酶快速检测试剂盒)。
1.3 药敏试验
采用K-B纸片扩散法，按2014年美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准取0.5麦氏单位Hi菌悬液涂布于Hi专用药敏培养基HTM(Hemophilustestmedium，美国OXOD公司)，贴上抗生素纸片，5%CO2、35～37℃培养18～24 h后测量抑菌圈直径并判读结果 ......
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