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编号:13296847
重组截短型TGF—β前体潜在相关肽的原核表达及其对HSC—T6细胞增殖的影响(1)
http://www.100md.com 2018年6月15日 《中国当代医药》 2018年第17期
重组截短型TGF—β前体潜在相关肽的原核表达及其对HSC—T6细胞增殖的影响,TGF-β前体潜在相关肽,蛋白纯化,HSC-T6
     [摘要]目的 初步研究截短型TGF-β前體潜在相关肽(LAP)的重组蛋白对HSC-T6 细胞增殖的影响。方法 PCR扩增截短型LAP片段,构建该片段的原核表达载体,经双酶切、DNA测序鉴定后,IPTG 0.5 mmol/L,37℃,4 h诱导出蛋白的大量表达,表达的蛋白经SDS-PAGE,Western blot检测,经镍琼脂糖亲和层析纯化重组蛋白, 将重组蛋白作用于大鼠肝星状细胞-T6(HSC-T6),用MTT法检测不同浓度重组蛋白对细胞增殖作用的影响。结果 原核表达载体构建成功,成功表达、纯化了重组蛋白,且HSC-T6细胞的增殖程度随重组蛋白浓度的增加而降低。结论 重组蛋白可抑制HSC-T6细胞的增殖,为后续研究LAP片段对TGF-β活化过程的干扰作用及对器官纤维化的影响奠定基础。

    [关键词]TGF-β前体潜在相关肽;原核表达;蛋白纯化;HSC-T6;增殖

    [中图分类号] R331 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2018)6(b)-0004-04

    Prokaryotic expression of latency-associated peptide of recombinant truncated TGF-β precursor and its influence on proliferation of HSC-T6 cell

    SHI Yong-ping1 ......
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