1.2.4实时荧光定量PCR 取两组大鼠另一侧肾脏的肾皮质，提取出总RNA，逆转录成cDNA，进行Real-time PCR，检测TRPV5在结石模型大鼠肾中的表达。

    取大鼠肾脏组织约60 mg，按Trizol(美国Invitrogen公司)操作方法，抽取大鼠肾脏组织总RNA，检测提示抽提的RNA未见明显降解，可做为逆转录模板。TRPV5引物：上游引物5′-TCCGTGATGCCAACCGTACAC-3′，下游引物5′-GCCCCAATGACTGTCACGAGT-3′，GAPDH引物：上游引物5′-CGGCAAGT-TCAACGGCACAG-3′，下游引物5′-CGCCAGTAGACTCCACGACAT -3′。取总RNA 2 μL，根据逆转录试剂盒(北京天根生化科技有限公司)操作方法逆转录合成模板cDNA，再进行实时荧光定量PCR，检测Ct值，计算TRPV5 Ct值与GAPDH Ct值的比值。

    1.3统计学方法

    采用SPSS 19.0统计学软件对数据进行分析 ......