超高效液相-三重四级杆质谱法测定健脾丸中展青霉素的含量(1)
[摘要]目的 建立超高效液相-三重四级杆质谱法(UPLC-MS/MS)测定健脾丸中展青霉素的含量。方法 样品经果胶酶酶解后，用乙酸乙酯提取展青霉素，提取液经HLB固相萃取小柱净化后，采用UPLC-MS/MS进行测定。结果 展青霉素在0.020～2.010 μg/ml内线性关系良好，回归方程为Y=666 825X+27 524(r=0.9970)，检出限(LOD)为0.0101 μg/ml，定量限(LOQ)为0.0201 μg/ml。结论 本法灵敏、快速、准确、专属性强，可用于健脾丸中展青霉素的测定。
[关键词]健脾丸;展青霉素;超高效液相-三重四级杆质谱法
[中图分类号] R917 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2019)11(c)-0031-04
Determination of patulin in Jianpi Pills by ultra high performance liquid chromatography-tandem triple quadruple mass spectrometry
LIU Dong-sheng LIU Ting-ting SU Rui XU Ji-jun YAO Shi-xia ZHU Xu-jiang
Gansu Institute for Drug Control， Lanzhou 730070， China
[Abstract] Objective To establish an ultra high performance liquid chromatography-tandem triple quadruple mass spectrometry (UPLC-MS/MS) method for the content determination of patulin in Jianpi Pills. Methods After being enzyme-hydrolyzed by pectinase， extracted by water， and purified by HLB solid-phase extraction column， patulin were analyzed by UPLC-MS/MS. Results The calibration curves of the patulin showed good linearities in the range of 0.020-2.010 μg/ml with the regression equation Y=666 825X+27 524 (r=0.9970). The limit of detection (LOD) was 0.101 μg/ml， and the limit of quantification (LOQ) was 0.0201 μg/ml. Conclusion The method is sensitive， rapid， accurate and specific enough to determine patulin in Jianpi Pills.
[Key words] Jianpi Pills; Patulin; Ultra high performance liquid chromatography-tandem triple quadruple mass spectrometry
展青霉素(patulin)，屬多聚乙酰内酯，可以造成人体神经系统、呼吸系统和泌尿系统的严重损害，并具有一定的致癌性[1-3]。正是由于展青霉素对人体的严重危害性，许多国家都对食品中的展青霉素的含量进行限定。WHO规定苹果汁中展青霉素的量最高为50 μg/kg[4];我国也对苹果及其山楂为原料制成品中展青霉素的量进行了同样的限定。研究相关文献发现对于展青霉素在山楂等酸性果实及其食品制成品中检验检测方法的报道最为常见[5-13]。但是含酸性果实类中药以及中成药中展青霉素的检验检测方法的报道较少，且多为中药材[14-18]。由于健脾丸为原粉入药，所以笔者对处方中的山楂可能存在展青霉素污染的风险进行研究。并且针对中成药基质干扰以及样品特点，结合前人的研究，建立了超高效液相-三重四级杆质谱法(ultra high performance liquid chromatography-tandem triple quadruple mass spectrometry，UPLC-MS/MS)测定健脾丸中的展青霉素的含量。并采用Oasis HLB固相萃取柱对样品进行净化处理，旨在为研究含山楂类的中成药中展青霉素提供一定的参考依据。
1仪器与试药
1.1仪器设备
LCMS-8045 UPLC-MS/MS联用仪(岛津);METTLER TOLEDO ME204和MS205DU型分析天平(梅特勒-托利多公司);KQ-500DE数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);XK80-A快速混匀器(江苏新康医疗器械有限公司);SHY-2A多功能水浴恒温振荡器(金坛市大地自动化仪器厂);5430R离心机(艾本德);微孔滤膜(希波士);HGC-24A氮气吹干仪(天津市很高科技发展有限公司)。10 μl Eppendorf加样枪和100 μl Eppendorf加样枪(艾本德)。
1.2试药
展青霉素标准品(TRC公司，批号：4-YMK-42-4)、果胶酶(麦克林公司，批号：C100083945);Oasis HLB柱(美国Waters公司，3 ml/60 mg);甲醇、乙腈、乙酸乙酯、冰乙酸均为色谱纯;水为纯净水;其他试剂为分析纯。, 百拇医药(刘东升 刘婷婷 苏蕊 徐继军 姚世霞 朱旭江)
[关键词]健脾丸;展青霉素;超高效液相-三重四级杆质谱法
[中图分类号] R917 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2019)11(c)-0031-04
Determination of patulin in Jianpi Pills by ultra high performance liquid chromatography-tandem triple quadruple mass spectrometry
LIU Dong-sheng LIU Ting-ting SU Rui XU Ji-jun YAO Shi-xia ZHU Xu-jiang
Gansu Institute for Drug Control， Lanzhou 730070， China
[Abstract] Objective To establish an ultra high performance liquid chromatography-tandem triple quadruple mass spectrometry (UPLC-MS/MS) method for the content determination of patulin in Jianpi Pills. Methods After being enzyme-hydrolyzed by pectinase， extracted by water， and purified by HLB solid-phase extraction column， patulin were analyzed by UPLC-MS/MS. Results The calibration curves of the patulin showed good linearities in the range of 0.020-2.010 μg/ml with the regression equation Y=666 825X+27 524 (r=0.9970). The limit of detection (LOD) was 0.101 μg/ml， and the limit of quantification (LOQ) was 0.0201 μg/ml. Conclusion The method is sensitive， rapid， accurate and specific enough to determine patulin in Jianpi Pills.
[Key words] Jianpi Pills; Patulin; Ultra high performance liquid chromatography-tandem triple quadruple mass spectrometry
展青霉素(patulin)，屬多聚乙酰内酯，可以造成人体神经系统、呼吸系统和泌尿系统的严重损害，并具有一定的致癌性[1-3]。正是由于展青霉素对人体的严重危害性，许多国家都对食品中的展青霉素的含量进行限定。WHO规定苹果汁中展青霉素的量最高为50 μg/kg[4];我国也对苹果及其山楂为原料制成品中展青霉素的量进行了同样的限定。研究相关文献发现对于展青霉素在山楂等酸性果实及其食品制成品中检验检测方法的报道最为常见[5-13]。但是含酸性果实类中药以及中成药中展青霉素的检验检测方法的报道较少，且多为中药材[14-18]。由于健脾丸为原粉入药，所以笔者对处方中的山楂可能存在展青霉素污染的风险进行研究。并且针对中成药基质干扰以及样品特点，结合前人的研究，建立了超高效液相-三重四级杆质谱法(ultra high performance liquid chromatography-tandem triple quadruple mass spectrometry，UPLC-MS/MS)测定健脾丸中的展青霉素的含量。并采用Oasis HLB固相萃取柱对样品进行净化处理，旨在为研究含山楂类的中成药中展青霉素提供一定的参考依据。
1仪器与试药
1.1仪器设备
LCMS-8045 UPLC-MS/MS联用仪(岛津);METTLER TOLEDO ME204和MS205DU型分析天平(梅特勒-托利多公司);KQ-500DE数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);XK80-A快速混匀器(江苏新康医疗器械有限公司);SHY-2A多功能水浴恒温振荡器(金坛市大地自动化仪器厂);5430R离心机(艾本德);微孔滤膜(希波士);HGC-24A氮气吹干仪(天津市很高科技发展有限公司)。10 μl Eppendorf加样枪和100 μl Eppendorf加样枪(艾本德)。
1.2试药
展青霉素标准品(TRC公司，批号：4-YMK-42-4)、果胶酶(麦克林公司，批号：C100083945);Oasis HLB柱(美国Waters公司，3 ml/60 mg);甲醇、乙腈、乙酸乙酯、冰乙酸均为色谱纯;水为纯净水;其他试剂为分析纯。, 百拇医药(刘东升 刘婷婷 苏蕊 徐继军 姚世霞 朱旭江)