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编号:13487263
黄芪建中汤含药血清联合顺铂对人肺癌A549细胞增殖及E-cadherin、Snail1表达的影响(3)
http://www.100md.com 2020年4月5日 《中国当代医药》 202010
     1.2.5实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测E-cadherin和Snail1基因的表达 引物由武汉金开瑞生物工程有限公司设计,所用的引物序列如下。E-cadherin上游引物:5′-TCAAGGTGAGGGGTTAAGCAC-3′,下游引物:5′-CGACGTTAGCCTCGTTCTCA-3′;snail1上游引物:5′-CCAGACCCACTCAGATGTCA-3′,下游引物:5′-GGACTCTTGGTGCTTGTGGA-3′;β-actin上游引物:5′-GAGCTACGAGCTGCCTGACG-3′,下游引物:5′-GTAGTTTCGTGGATGCCACAG-3′。取出根据实验分组给予处理因素培养48 h后的细胞培养瓶,分别提取各组A549细胞株的总RNA(按照M5 TotalRNA Extraction Reagent提取步骤),检测样本RNA的浓度,计算RNA浓度(μg/μl)=OD260×40×稀释倍数/1000。合成cDNA按照逆转录试剂盒的说明 ......
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