尿沉渣分析仪SysmexUF-500i在快速筛查尿路感染中的应用价值(2)
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参见附件。
1 材料与方法
1.1 材料 收集2011年6月-2012年6月期间住院患者疑似尿路感染者清洁中段尿260份,女178例,男82例,年龄8~85岁。女性均要求清洗外阴部后留取中段尿标本。UF-500i(日本 Sysmex公司);血平板购于上海伊华科技有限公司;细菌鉴定仪(VITEK-60)及配套细菌鉴定板条为法国生物梅里埃公司产品。
1.2 方法
1.2.1 定量细菌培养和菌种鉴定 取5 μl尿液滴注入血平板,用接种环涂抺,放置35 ℃温箱内孵育24 h,取出作菌落计数。革兰阴性菌>105 cfu/ml、革兰阳性菌>104 cfu/ml为尿定量细菌培养结果阳性,并对这些菌株进一步鉴定到种。
1.2.2 UF-500i定量分析 严格按照操作规程进行操作,质控符合要求后方可测定尿液标本。定量计数细菌>2750/μl为阳性[3],白细胞>20/μl为阳性[4]。以此标准计算UF-500i细菌定量计数参数诊断尿路感染的假阳性、假阴性、敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和诊断准确率。
1.3 统计学处理 应用SPSS 13.0统计软件包进行统计分析,计数资料采取 字2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 细菌培养 260例尿液标本中细菌培养阳性87例,占前两位的阳性致病菌分别为大肠埃希菌(55.2%)和克雷伯菌属细菌(11.5%)。肠球菌8例(9.3%),酵母菌6例(6.9%),凝固酶阴性葡萄球菌6例(6.9%),变形杆菌5例(5.8%),金黄色葡萄球菌2例(2.2%),铜绿假单孢菌2例(2.2%)。
2.2 UF-500i定量计数细菌与定量培养结果的比较 以定量培养结果阳性为诊断UTI的金标准, 随着UF-500i细菌定量计数临界值的扩大,诊断UTI的特异性逐渐增加,敏感性逐渐下降;若以UF-500i细菌定量计数临界值3750/μl为筛查UTI的诊断临界值,诊断准确率达到最大值(图1),其诊断UTI的敏感性为85.1%,特异性为91.3%,阳性预计值为87.0%,阴性预计值为92.5%,假阳性率为8.7%,假阴性率为14.9%,诊断准确率为90.7%,此时UF-500i细菌定量计数与定量培养结果之间无统计学差异(P>0.05)(表1)。在尿培养阳性的前两位致病菌中,UF-500i 定量计数大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌与定量培养结果的相关性分别为0.990和0.989(图2)。
图1 UF-500i细菌定量计数不同临界值对UTI的诊断评价
表1 UF-500i细菌定量计数与定量培养结果比较 例
UF-500i细菌
定量计数 定量培养 合计
阳性 阴性
阳性 74 11 85
阴性 13 162 175
合计 87 173 260
图2 UF-500i细菌定量计数与定量培养结果的相关性
3 讨论
UF-500i尿沉渣分析仪是目前广泛应用于临床实验室较为先进的尿沉渣分析仪,它综合流式细胞技术和电阻抗原理,通过对尿中有形成分进行荧光染色后,测定其荧光强度、荧光脉冲宽度、前项散射光强度及其脉冲宽度,从而对尿中有形成分进行鉴别和计数。它具有独立的细菌检测通道,可以有效避免其他有形成分对细菌产生的干扰,确保UF-500i能更准确的检出和定量细菌。
按照细菌培养革兰阴性菌>105 cfu/ml和革兰阳性菌>104 cfu/ml的阳性标准,在260份中段尿标本中,共检出87例UTI,其中位居前两位的分别是大肠埃希菌48例(55.2%)和克雷伯菌属细菌10例(11.5%),与魏宏莲等[5]报道UTI主要由革兰阴性杆菌和肠球菌属引起有所不同,可能与笔者所在医院的住院患者的来源和分布不同有关。随着UF-500i尿沉渣分析仪细菌计数值的增加,尿培养阳性率也相应增加,在尿培养阳性致病菌的前两位中,UF-500i细菌定量计数与定量培养结果的相关性分别为0.990和0.989(图2),说明两者成正相关。以定量细菌培养结果为金标准,UF-500i细菌定量计数临界值3750/μl为筛查UTI的诊断临界值,诊断准确率达到最高值,其诊断UTI的敏感性为85.1%,特异性为91.3%,阳性预计值为87.0%,阴性预计值为92.5%,假阳性率为8.7%,假阴性率为14.9%,诊断准确率为90.7%。由于影响因素较多,UF-500i细菌定量计数不能成为单一的诊断标准,应结合仪器中白细胞[3]、亚硝酸盐等感染性指标和患者临床表现综合分析。
UF-500i定量计数细菌仍存在一定的假阳性和假阴性。UF-500i定量计数细菌包括活菌和失活菌,而尿培养只能计数活菌数;或是培养过程中细菌在琼脂培养基上可能为“静菌”,不发育,即正处于所谓的“不能培养状态”[6]。说明细菌培养为阴性时并不能完全排除UTI。当尿中病原菌体积增大或聚集成簇[7]时,可能被尿液分析仪误作其他颗粒[8-9]而使结果呈“阴性”,造成漏检。在UF-500i细菌定量计数阴性的标本中,定量培养发现大肠埃希菌、肠球菌和葡萄球菌等不同菌种。因此,当UF-500i检测出尿细菌计数>3750/μl的患者,应结合临床表现,即使尿培养为阴性,也应考虑尿路感染的可能性,给予针对性治疗。UF-500i操作简便、快速、准确性高,在一定范围内可作为尿路感染的快速筛检指标和指导临床经验用药。鉴于它存在一定的假阳性和假阴性,不能完全替代尿液定量细菌培养。
参考文献
[1] Juthani-Mehta M,Tinetti M,Perrelli E,et al.Diagnostic accuracy of criteria for urinary tract infection in a cohort of nursing home residents[J].J Am Geriatr Soc,2007,55(7):1072-1077.
[2] 贝政平,蔡映云.内科疾病诊断标准[M].第2版.北京:科学出版社,2007:485-486 ......
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