【摘要】 目的：利用RNA干扰技术(RNAi)下调肌腱细胞中V型胶原蛋白的表达，拟为后续探讨V型胶原在损伤肌腱修复过程中的作用提供可行的试验方法。方法：分别设计干扰大鼠V型胶原[COL5( 1)2( 2)]两个亚基COL5 1和COL5 2表达的siRNA序列，转染大鼠肌腱细胞。通过实时荧光定量PCR和免疫荧光法检测V型胶原在基因和蛋白水平的表达。结果：转染特定的siRNA后，V型胶原两个亚基的基因表达被抑制约70%，蛋白表达也被明显抑制。结论：RNAi法可有效地抑制大鼠肌腱细胞中V型胶原的基因和蛋白水平表达。为进一步研究V型胶原在肌腱损伤修复过程中的作用提供了可行的试验方法。

    【关键词】 肌腱细胞； V型胶原； RNA干扰技术； 基因表达

    年龄增长和运动过度均可造成肌腱韧带损伤。目前临床上的治疗方法主要是理疗和手术缝合。由于肌腱韧带内细胞、血管较少，再生能力较差，所以愈后常由瘢痕组织修复，力学性能低下，易造成重复断裂。

    V型胶原在正常肌腱组织中含量很少，但在损伤肌腱中却持续高表达52周[1] ......