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编号:12707980
碱性裂解液提取DNA法在环氧化酶亚型基因敲除小鼠基因型鉴定中的应用(2)
http://www.100md.com 2014年2月25日 李振华等
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    参见附件。

     COX-2子代基因鉴定部分结果如图2所示,凝胶最左侧为Maker,编号3可见大小为905 bp左右的条带,为纯合子;编号1、2、4可见大小为905 bp和760 bp左右的条带,为杂合子;编号5可见大小为760 bp左右的条带,为野生型。

    3 讨论

    小鼠基因敲除技术是研究整体动物水平基因功能的一种直接有效方法,通过基因敲除动物,可以直接分析被敲除基因的功能和作用[6]。目前,心血管系统中COX亚型的生理功能及其在病理状态下的变化尚需进一步明确。一般认为,COX-1为结构型,主要表达于正常组织,在维持肾脏血流和调节血小板聚集中具有重要作用[7]。COX-2为诱导型,又称“炎症反应基因”,正常生理状态下几乎不表达或少表达,当受到刺激后便迅速表达合成,参与多种病理生理过程[8]。深入研究COX在心血管系统的作用机制,有助于明确各种心血管疾病的发生发展机制[9]。

    为了进一步确定COX-1和COX-2基因在心血管病理生理方面的功能和作用,本实验室引进了COX-1和COX-2基因敲除小鼠杂合子,严格按照SPF级标准进行小鼠的饲养和繁殖,由于杂合子交配所产生的子代可能出现3种基因型,即野生型(COX-1+/+;COX-2+/+)、杂合子(COX-1+/-;COX-2+/-)和纯合子(COX-1-/-;COX-2-/-) ......

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