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编号:12609017
辣椒素受体在大鼠坐骨神经损伤再生过程中的作用研究(2)
http://www.100md.com 2015年4月25日 中国医学创新 2015年第12期
     1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物来源 中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供SPF级SD大鼠24只,体重(190±10)g,许可证编号SCXK(军)2007-004。

    1.1.2 主要试剂和仪器来源 AMG-517(Selleck Chemicals,USA),微量注射器(上海注射器三厂提供),甲苯胺蓝(北京化工厂提供),光学显微镜(Olympus,日本),戊二醛、锇酸、二甲胂酸钠由本校中心实验室提供。

    1.2 方法

    1.2.1 动物模型制备 雄性SD大鼠(180~200 g)24只,随机分为单纯损伤组和给予拮抗剂组(AMG517组),每组12只,每组均设1周、2周时间段。1%戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔麻醉。其中,给予拮抗剂组于损伤前1 h用微量注射器于右后肢足底皮下注射AMG517(300 μg/kg)[3];单纯损伤组于损伤前于右后肢足底皮下按同等标准注射生理盐水。右后肢脱毛、消毒,股部行纵形切口切开皮肤约1.5 cm,延肌间隙分离筋膜、肌肉,暴露坐骨神经,在距梨状肌下缘5 mm处用止血钳夹闭坐骨神经60 s。逐层缝合后单独饲养。

    1.2.2 标本的制备 在预计的观察时间点麻醉动物,除去双后肢被毛,行股后部纵形切口切开皮肤,分离筋膜、肌肉,充分暴露并游离坐骨神经,从梨状肌下缘至坐骨神经分叉处将其剪下,右侧再分别分为近、中、远约0.5 mm各三段,放入4%戊二醛中,4 ℃条件下放置3 h后,放入0.1 mol/L二甲胂酸钠(pH=7.3)漂洗5次 ......
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