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编号:12593105
蒙药扎冲十三味丸对大鼠缺血性脑损伤后海马组织细胞凋亡影响的初步研究(2)
http://www.100md.com 2015年7月25日 中国医学创新 2015年第21期
     1.4 模型成功标志 待大鼠自然苏醒后,根据Longa 5分制评分标准,对大鼠神经功能缺失进行评分。无明显损伤症状者为0分;对侧前爪不能完全伸展者为1分;行走时肢体向对侧旋转者为2分;行走时向对侧倾倒者为3分;意识丧失,不能自发行走者为4分。评分结果在1~3分内的鼠为有效模型。剔除未入选及死亡的大鼠,每组剩余6只。

    1.5 给药方法 按照2%的浓度,将扎冲十三味丸用蒸馏水配制成溶液,灌胃给药,每日1次,模型组大鼠均喂予蒸馏水。正常对照组大鼠置同一环境下饲养。

    1.6 标本取材 待第2次注血后,在第1、3、5、7天分别采用断头法处死各组大鼠,迅速取出脑海马组织。全部取材过程置于冰盒上进行。

    1.7 凋亡细胞的检测 将取出的海马组织置于金属细胞筛上,用玻璃注射器芯研磨,并用显微镜下观察,待研磨成单细胞后,加入PBS离心10 min,弃上清后取沉淀用PBS稀释至10 mL,反复吹打制成单细胞悬液,经400目细胞筛过滤,调整细胞浓度至1×106/mL,按照试剂盒操作步骤,取1 mL细胞悬液,依次标记annexin-V-FITC和PI,上机检测 ......
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