紫杉醇脂质纳米粒子对KB、SKOV3细胞作用的对比分析(1)
【摘要】 目的：比较紫杉醇脂质纳米粒子(TAX-NLC)对KB、SKOV3细胞的抑制作用。方法：激光共聚焦显微镜观察TAX-NLC作用于KB、SKOV3细胞对Ca2+的影响；MTT法测定TAX-NLC作用于KB、SKOV3细胞抑制率；激光共聚焦显微镜观察TAX-NLC作用于KB、SKOV3细胞形态学的变化。结果：TAX-NLC作用后KB细胞Ca2+浓度高于SKOV3细胞；TAX-NLC作用后KB细胞的抑制率高于SKOV3细胞；TAX-NLC作用KB细胞产生多核细胞高于SKOV3。结论：TAX-NLC对KB细胞更敏感，Ca2+浓度、抑制率、多核细胞比例密切相关联。
【关键词】 紫杉醇纳米粒子； 紫杉醇； Ca2+； 多核细胞
Comparison and Analysis of the Affection of TAX-NLC on KB， SKOV3 Cells/WANG Zong-zhan，YANG Jin-xia，ZHOU Mi，et al.//Medical Innovation of China，2015，12(24)：001-004
, 百拇医药
【Abstract】 Objective：To compare the inhibitory effect of paclitaxel lipid nanoparticles (TAX-NLC) on KB， SKOV3 cells. Method：The affection of TAX-NLC on Ca2+ in KB， SKOV3 cells by using Laser confocal microscope were observed.MTT method was used to determine the inhibition rate of TAX - NLC action in KB， SKOV3 cell.The cell morphological changes of TAX - NLC role in KB， SKOV3 cells were observed by Laser confocal microscope.Result：After the TAX-NLC acting on KB， SKOV3 cells， the concentration of Ca2+ of KB cells was higher than that of SKOV3 cells.And the inhibition rate of KB cell was higher than that of SKOV3 cells，the production of KB multinucleated cells was more than that of SKOV3 cells.Conclusion：TAX-NLC is more sensitive to KB cells， Ca2+ concentration， the inhibition rate，multinucleated cells are closely associated.
, 百拇医药
【Key words】 Paclitaxel lipid nanoparticles； Paclitaxel； Ca2+； Multinucleated cells
First-author’s address：Qingdao Tumor Hospital， Qingdao 266042，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2015.24.001
紫杉醇(TAX)被广泛用于乳腺癌、非小细胞肺癌、卵巢癌、头颈部肿瘤。紫杉醇水溶性差，将其溶于无水乙醇和聚氧乙基代蓖麻油的混合溶媒中，此溶媒容易导致严重的过敏反应[1]。脂质体作为转运载体，其制作简单、能降低药物不良反应的发生并容易实现肿瘤靶向等治疗的优点[2]。紫杉醇脂质纳米粒子作用KB、SKOV3，探讨其作用机制，为临床应用提供基础证实。
, 百拇医药 1 材料与方法
1.1 材料 紫杉醇纳米粒子(TAX-NLC，苏州大学，批号：20080525)，1640培养基(GIBCO公司)，Fluo-3(美国Molecular Probes公司)，小牛血清(GIBCO公司)，胎牛血清(GIBCO公司)，Dapi(上海宝曼科技生物有限公司)，MTT(上海励瑞生物科技有限公司)，Phellotin Tax-Red(美国Molecular Probes公司)，TCP-SP型激光共聚焦显微镜(德国Leica公司)，人口腔上皮癌KB细胞(中科院上海细胞库)，人卵巢癌SKOV3细胞(中科院上海细胞库)，HERA CO2培养箱(德国Kedro公司)。
1.2 细胞培养 KB细胞以含15%小牛血清的RPMI-1640培养，SKOV3以含15%胎牛血清的RPMI-1640培养，培养箱CO2浓度设定为5%，温度设定为37 ℃。
1.3 方法
, 百拇医药
1.3.1 TAX-NLC作用KB、SKOV3细胞后钙浓度的变化 制备KB、SKOV3细胞悬液，接种在盖玻片上；培养24 h后，PBS洗涤3次；放入4 μmol/L的Fluo-3负载液中，在常温条件下避光培养40 min，PBS洗涤；放入激光共聚焦显微镜专用凹槽内，加入200 μL无血清1640培养基；对照组为200 μL无血清1640，实验组为终浓度是100 nmol/L的TAX-NLC 200μL，同时在电脑上标记细胞，动态观测细胞内荧光强度变化。
1.3.2 TAX-NLC作用KB、SKOV3细胞对F-肌动蛋白的影响 KB、SKOV3细胞接种在盖玻片上，培养24 h，加入最终浓度为100 nmol/L的TAX-NLC，作用3 h，PBS洗涤细胞，继续培养24 h。PBS洗涤，以戊二醛固定30 min，PBS洗涤，加入1%的tritonX-100和1%的BSA放置30 min，PBS洗涤。再加入5 μg/mL的Taxax Red-x phallodin 100 μL避光培养30 min，PBS洗涤，加入2 μg/mL的Dapi 100 μL避光培养30 min。激光共聚焦显微镜下观察KB、SKOV3细胞F-肌动蛋白形态学变化。, 百拇医药(王宗站 杨金霞 周宓 邢晓波)
【关键词】 紫杉醇纳米粒子； 紫杉醇； Ca2+； 多核细胞
Comparison and Analysis of the Affection of TAX-NLC on KB， SKOV3 Cells/WANG Zong-zhan，YANG Jin-xia，ZHOU Mi，et al.//Medical Innovation of China，2015，12(24)：001-004
, 百拇医药
【Abstract】 Objective：To compare the inhibitory effect of paclitaxel lipid nanoparticles (TAX-NLC) on KB， SKOV3 cells. Method：The affection of TAX-NLC on Ca2+ in KB， SKOV3 cells by using Laser confocal microscope were observed.MTT method was used to determine the inhibition rate of TAX - NLC action in KB， SKOV3 cell.The cell morphological changes of TAX - NLC role in KB， SKOV3 cells were observed by Laser confocal microscope.Result：After the TAX-NLC acting on KB， SKOV3 cells， the concentration of Ca2+ of KB cells was higher than that of SKOV3 cells.And the inhibition rate of KB cell was higher than that of SKOV3 cells，the production of KB multinucleated cells was more than that of SKOV3 cells.Conclusion：TAX-NLC is more sensitive to KB cells， Ca2+ concentration， the inhibition rate，multinucleated cells are closely associated.
, 百拇医药
【Key words】 Paclitaxel lipid nanoparticles； Paclitaxel； Ca2+； Multinucleated cells
First-author’s address：Qingdao Tumor Hospital， Qingdao 266042，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2015.24.001
紫杉醇(TAX)被广泛用于乳腺癌、非小细胞肺癌、卵巢癌、头颈部肿瘤。紫杉醇水溶性差，将其溶于无水乙醇和聚氧乙基代蓖麻油的混合溶媒中，此溶媒容易导致严重的过敏反应[1]。脂质体作为转运载体，其制作简单、能降低药物不良反应的发生并容易实现肿瘤靶向等治疗的优点[2]。紫杉醇脂质纳米粒子作用KB、SKOV3，探讨其作用机制，为临床应用提供基础证实。
, 百拇医药 1 材料与方法
1.1 材料 紫杉醇纳米粒子(TAX-NLC，苏州大学，批号：20080525)，1640培养基(GIBCO公司)，Fluo-3(美国Molecular Probes公司)，小牛血清(GIBCO公司)，胎牛血清(GIBCO公司)，Dapi(上海宝曼科技生物有限公司)，MTT(上海励瑞生物科技有限公司)，Phellotin Tax-Red(美国Molecular Probes公司)，TCP-SP型激光共聚焦显微镜(德国Leica公司)，人口腔上皮癌KB细胞(中科院上海细胞库)，人卵巢癌SKOV3细胞(中科院上海细胞库)，HERA CO2培养箱(德国Kedro公司)。
1.2 细胞培养 KB细胞以含15%小牛血清的RPMI-1640培养，SKOV3以含15%胎牛血清的RPMI-1640培养，培养箱CO2浓度设定为5%，温度设定为37 ℃。
1.3 方法
, 百拇医药
1.3.1 TAX-NLC作用KB、SKOV3细胞后钙浓度的变化 制备KB、SKOV3细胞悬液，接种在盖玻片上；培养24 h后，PBS洗涤3次；放入4 μmol/L的Fluo-3负载液中，在常温条件下避光培养40 min，PBS洗涤；放入激光共聚焦显微镜专用凹槽内，加入200 μL无血清1640培养基；对照组为200 μL无血清1640，实验组为终浓度是100 nmol/L的TAX-NLC 200μL，同时在电脑上标记细胞，动态观测细胞内荧光强度变化。
1.3.2 TAX-NLC作用KB、SKOV3细胞对F-肌动蛋白的影响 KB、SKOV3细胞接种在盖玻片上，培养24 h，加入最终浓度为100 nmol/L的TAX-NLC，作用3 h，PBS洗涤细胞，继续培养24 h。PBS洗涤，以戊二醛固定30 min，PBS洗涤，加入1%的tritonX-100和1%的BSA放置30 min，PBS洗涤。再加入5 μg/mL的Taxax Red-x phallodin 100 μL避光培养30 min，PBS洗涤，加入2 μg/mL的Dapi 100 μL避光培养30 min。激光共聚焦显微镜下观察KB、SKOV3细胞F-肌动蛋白形态学变化。, 百拇医药(王宗站 杨金霞 周宓 邢晓波)