1 材料与方法

    1.1 材料 胶质瘤石蜡标本共41份，均来源于2010年4月-2013年3月本院神经外科进行手术切除的患者。术前均未行放、化疗，且为第1次手术切除，并经病理证实，按WHO分级分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级。同时选择高血压脑出血或颅脑损伤患者行内减压手术时的脑组织标本9例作为对照组，石蜡标本由本院病理科负责切片提供，以4μm厚连续切片4张。

    1.2 HE染色 二甲苯脱蜡2次，10 min/次；浓度梯度酒精(100%-90%-80%-70%)作用2 min/次，蒸馏水洗2遍，1 min/次。加入苏木素染液染色10 min，水洗1 min。加入分化液(1%盐酸酒精)分化3 s，水洗。加入伊红液浸染2 min，水洗后浓度梯度酒精(80%-90%-100%)分别脱水2、4、5 min。移入二甲苯Ⅰ中透明3～5 min，移入二甲苯Ⅱ中透明5～10 min，树胶封固。

    1.3 免疫组化SP法 68 ℃烤片后，进行常规二甲苯脱蜡，梯度酒精脱水。加入3% H2O2于37 ℃孵育10 min，阻断灭活内源性过氧化物酶，然后用PBS冲洗5 min，重复3次。加入0.01M枸橼酸缓冲液(pH 6.0)进行抗原修复，重复上述步骤PBS冲洗。加入正常羊血清工作液封闭，然后滴加GSK-3β一抗(CST公司)于4 ℃冰箱孵育过夜 ......