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编号:12979582
紫檀芪对C6胶质瘤细胞凋亡及Caspase—3活性的影响(2)
http://www.100md.com 2017年1月5日 《中国医学创新》 2017年第1期
     1.2 方法

    1.2.1 细胞培养 将C6细胞用完全培养基(DMEM培养基、10%胎牛血清及1%双抗)置于37 ℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养至对数期备用。

    1.2.2 MTT法检测PTE对C6细胞增殖的抑制作用 调整细胞浓度为5×107/L,96孔培养板中每孔加入100 μL,待其贴壁后,再加入PTE溶液100 μL,使PTE终浓度为10、20、40 μmol/L,对照组加入同体积含0.01%DMSO的完全培养基,分别培养24、48、72 h,加20 μL的MTT,4 h后弃上清,每孔加入DMSO 150 μL,在37 ℃恒温摇床上震荡10 min,酶标仪570/630 nm处测定各组OD值。

    1.2.3 AO/EB荧光染色法检测细胞凋亡 C6细胞以3×107/L的浓度铺100 μL于激光共聚焦培养皿,4 h后弃掉旧培养液,加入不含胎牛血清的DMEM培养基,继续培养4 h后,加入PTE(分组同1.2.2)继续培养24 h。吸弃原培养液,用PBS洗涤3遍 ......
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