1 材料与方法

    1.1 实验动物和试剂 选用两月龄雌性SD大鼠60只，体重范围(200±10)g，标准饲养。按照随机数字表法分为两组，分别为注射生理盐水的对照组和按15 mg/(kg·d)注射褪黑素的实验组，每组30只。大鼠乳腺癌SHZ-88细胞购于上海生命科学院，褪黑素购于美国Sigma公司，TGF-β1和IL-35的ELISA试剂盒购于美国R&D公司。

    1.2 建立动物模型 乳腺癌细胞株于培养瓶中传代培养，当癌细胞培养至对数生长期时，吹打制成单细胞悬液，每只大鼠按5×105个细胞量在大腿内侧根部皮下接种SHZ-88乳腺癌单细胞悬液，1次/只。自接种日起，每日18∶00分别按对照组和实验组的不同干预手段，给予腹腔内注射生理盐水或15 mg/(kg·d)的褪黑素，1次/d。接种后第10天可在接种处触及皮下瘤块，抽取另一侧大腿股动脉外周血待检测，处死荷乳腺癌大鼠，切除接种处瘤块并经病理切片观察证实为乳腺癌。

    1.3 ELISA法检测 采用双抗体夹心ELISA法检测大鼠外周血血清中TGF-β1、IL-35的水平 ......