2 结果

    2.1 骨关节细胞原代培养和鉴定 软骨细胞原代培养中，约24 h出现贴壁生长，细胞三角形或多角形，传1代后关节软骨细胞增殖速度加快，关节软骨细胞形态为梭形，甲苯胺蓝鉴定结果显示关节软骨分泌蛋白多糖，染色显蓝色，细胞核清晰可见，软骨形态以梭形为主。免疫细胞化学染色Ⅱ型胶原显棕黄色，表明培养的细胞为关节软骨细胞。见图1。

    2.2 免疫细胞化学染色检测CollagenⅡ、Wnt3a、Wnt5a、Wnt16 ICC染色结果显示：CollagenⅡ抗体、Wnt5a抗体和Wnt16抗体在软骨细胞有表达，表达位置在胞浆。Wnt3a抗体在软骨细胞有表达，表达位置在胞核。三组中CollagenⅡ、Wnt3a、Wnt5a和Wnt16表达。见图2～5和表2。

    2.3 qPCR染料法检测Wnt3a、Wnt5a、Wnt16 Wnt3a在空白对照组和IL-1β诱导组表达比较，差异无统计学意义(P>0.05)，在IL-1β+ALN组中表达量明显升高，差异有统计学意义(P<0.05);Wnt5a在IL-1β诱导组中的表达量明显高于空白对照组，差异有统计学意义(P<0.05);ALN处理后，表达量降低，但仍高于空白对照组，差异有统计学意义(P<0.05);Wnt16在IL-1β诱导组中表达量明显低于空白对照组 ......