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编号:13431802
新生大鼠松果体细胞体外分离培养及增殖情况观察(3)
http://www.100md.com 2019年12月25日 《中国医学创新》 2019年第36期
     1.3 大鼠松果体细胞体外增殖情况观察 根据CCK8法,将传代第1、3、5代对数生长期细胞分别取出,随后分别以1×105/孔的细胞密度接种在的96孔板内,每代为21个复孔。在每个孔内均注入剂量为100 μL的细胞培养液,随后将其放置于温度为37 ℃、5% CO2细胞培养箱中加以培养。加入10 μL CCK-8溶液后于37 ℃、5% CO2细胞培养箱内培养2 h。以只加入细胞培养液不加入细胞的空白孔为平行对照孔,最后比色时,以空白孔调零。用酶标仪测定不同时间点传代第1、3、5代松果体细胞450 nm波长处的吸光度值(A450),3孔/d,连续测7 d。以培养时间(d)为横坐标,A450值为纵坐标绘制传代第1、3、5代松果体细胞的生长曲线。

    1.4 统计学处理 使用SPSS 17.0软件对所得数据进行统计分析,计量资料用(x±s)表示,多组间比较采用方差分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 大鼠松果体细胞形态 原代松果体细胞主要以悬浮状态,而外形则以圆球形为主,当实行接种以后的15 min便会贴壁,绝大部分的细胞在经过1 d的培养后便会完成贴壁,发生贴壁后细胞主要以多角形或者是圆球形呈现,贴附于成纤维细胞层上方并且保持散在形势不断生长,在培养的整个流程中会伴随着细胞的分裂而不断地聚集生长 ......
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