徐润强 刘海盛

    【摘要】 目的：探究靶向血管内皮生长因子A(vascularendothelial growth factor A， VEGFA)调控促分裂原活化的蛋白激酶/细胞外调解蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase/extracellular regulated protein kinase， MAPK/ERK)和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3- kinase/protein kinase B， PI3K/Akt)信号通路在结直肠癌血管生成中的作用及机制。方法：收集本院2015年1月-2019年12月82例结直肠癌患者癌组织及癌旁正常组织，使用qRT-PCR检测患者癌组织、癌旁正常组织中VEGFA水平，分析VEGFA水平与患者临床病理特征的关系。将SW480细胞分为五组，分别为对照组(正常人结肠细胞)，空白组(无转染质粒)，pMIR-miR-29b组(转染miR-29b)，MAPK/ERK组(转染miR-29b后添加MAPK/ERK信号通路抑制剂PD98059)，PI3K/Akt组(转染miR-29b后添加PI3K/Akt信号通路抑制剂wortmanin)。检测各组细胞中VEGFA、MAPK/ERK及PI3K/Akt信号通路靶蛋白ERK、Akt、mTOR、Bcl-2的表达水平。将各组细胞移植至裸鼠，建立结直肠癌裸鼠转移瘤模型，观察各组裸鼠移植瘤生长情况，检测各组裸鼠肿瘤微血管密度变化情况。结果：癌组织VEGFA表达水平高于癌旁正常组织(P<0.05);癌组织内Ⅲ、Ⅳ期患者VEGFA mRNA水平高于Ⅰ、Ⅱ期患者(P<0.05)，淋巴结转移患者VEGFA表达水平高于无淋巴结转移患者(P<0.05)。与對照组相比，空白组、pMIR-miR-29b组、MAPK/ERK组、PI3K/Akt组VEGFA、ERK、Akt、mTOR、Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平均上升(P<0.05) ......