杨延周，陈敏慧，李可可

    (1.宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室，银川750004；2.宁夏医科大学第二临床医学院，银川市第一人民医院急诊科，银川750001)

    近年来有研究[1-2]显示，氧化应激(oxidative stress，OS)和适度的活性氧(reactive oxygen species，ROS)在雌性哺乳动物生殖过程中起着重要的作用，过多的ROS可引起生殖系统疾病。有研究[3]报道，生理水平的ROS参与许多的雌性生殖过程，如卵泡发育、卵母细胞成熟和排卵。此外，累积的OS和抗氧化剂还原型谷胱甘肽(glutathione，GSH)的耗竭引起细胞凋亡，ROS引起卵泡闭锁和颗粒细胞凋亡。

    动情周期是雌性哺乳动物生殖系统特征之一，动情周期中激素和生殖器官可发生节律性变化[4]，而生殖器官如卵巢和子宫的节律性变化受类固醇激素的调控。小鼠血清雌二醇(estrogen，E2)水平在动情前期达到峰值，一直持续到动情期直到排卵，在动情后期降低，在间情期维持较低的基础水平，孕激素(progesterone，P4)的节律性变化与雌激素相反[5]，此外，动情周期中的促乳素也发生节律性的变化[6]。近来的研究[7]发现，E2与心血管的OS密切相关，P4与人黄素化的颗粒细胞功能密切相关[8]。

    尽管OS参与多个哺乳动物生殖过程[9-11]，但是OS在雌性哺乳动物动情周期中的动态变化尚不清楚，动情周期OS动态变化是否与类固醇激素的变化相关也不清楚。因此，本研究主要探究了动情周期的OS水平，进而为揭示其在雌性小鼠生殖过程中的作用及机制奠定基础，对进一步揭示生殖疾病的发病机制具有重要的作用及意义。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    6~8周龄ICR雌性小鼠购自宁夏医科大学实验动物中心(动物许可证号：2020-0001)。实验动物饲养在特定的温度及适度条件下，给予标准的饲料喂养，并且自由饮食，所有的实验操作程序都严格按照宁夏医科大学动物伦理委员会的要求进行。应用阴道涂片方法确定小鼠的动情周期[12-14]。

    1.2 免疫组织化学

    收集小鼠动情前期、动情期、动情后期及间情期的输卵管伞部、壶腹部、峡部和子宫角，并立即固定在4%的多聚甲醛中，24 h后组织经脱水、透明及浸蜡处理之后，用石蜡包埋，切片(厚度为6 μm)。石蜡切片经过脱蜡、脱水之后进行抗原热(96～98℃)修复20 min，抗原修复液为0.1 mol·L-1柠檬酸、0.1 mol·L-1柠檬酸钠和水按9∶41∶450配制 ......