硫酸铍诱导人肺腺癌A549 细胞纤维化中细胞因子的变化
染毒,纤维细胞,空白对照,1材料与方法,2方法,3统计学方法,2结果,1BeSO4对A549细胞活性的影响,2细胞形态变化,3不同剂量BeSO4处理A549细胞中TGF-β1及其他纤维化相关因子蛋白相对表
戚发秋, 王 凯, 陈小惠, 刘红娅, 赵 枫, 付有娟, 关素珍(1.宁夏医科大学公共卫生与管理学院,银川 750004; 2.宁夏环境因素与慢性病控制重点实验室,银川 750004)
铍是一种硬质银灰色稀有金属,由于其优异的性能而被广泛应用于工业领域[1]。随着工业的发展,对铍的需求迅速增加,意味着作业人群的接触机也随之增加。铍及其化合物是全身毒物,可通过皮肤、黏膜和呼吸道暴露于人体,并在肺部积累[2]。短期过度接触可能导致急性化学性肺炎,长期职业接触低水平铍的工人受损害器官和组织可能会逐渐出现纤维增殖反应或慢性铍病(chronic beryllium disease,CBD)[3]。肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)是一类以肺间质成纤维细胞增殖以及细胞外基质(ECM)沉积为主要病理特征的不可逆性疾病[4]。目前CBD 的发病机制尚未完全明确。研究[5-6]发现,转化生长因子(TGF)-β是一种明确的致多种器官纤维化的关键细胞因子。本研究以硫酸铍(BeSO4)处理离体培养人A549细胞构建纤维化模型,并通过检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、TGF-β1、Ⅰ型胶原蛋白(collagen-Ⅰ,COL-Ⅰ)和Ⅲ型胶原蛋白(collagen-Ⅲ,COL-Ⅲ)的相对表达含量来验证,为铍及其化合物致PF 机制的后续研究提供基础。
1 材料与方法
1.1 材料
人肺腺癌肺泡基底上皮细胞(A549 细胞,购自中国科学院上海细胞库);胎牛血清(FBS,以色列BI 公司);细胞基础培养基(DMEM,以色列BI公司);磷酸盐缓冲液(美国HyClone 公司);Be-SO4·4H2O(上海易恩化学技术有限公司) ......
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