徐伟铭，杨佩浓，袁秋琦

    (1.台州恩泽医疗中心(集团)恩泽医院 病理科，浙江 黄岩 318050；2.台州恩泽医疗中心(集团)台州医院 病理科，浙江 台州 317000)

    健康科学临床研究

    甲状腺结节TSH受体基因突变和BRAF V600E突变检测的临床意义

    徐伟铭1，杨佩浓2，袁秋琦1

    (1.台州恩泽医疗中心(集团)恩泽医院 病理科，浙江 黄岩 318050；2.台州恩泽医疗中心(集团)台州医院 病理科，浙江 台州 317000)

    目的 探讨甲状腺结节TSH受体基因突变和BRAF V600E突变检测的临床意义。方法 收集120例甲状腺结节患者外周血样本，采用PCR扩增TSH受体基因第8号外显子和BRAF V600E基因，并进行测序，统计不同性质甲状腺结节TSH受体基因和BRAF V600E突变率；比较不同临床特征(性别、年龄、肿瘤大小、被膜外侵犯、淋巴结转移、多发病灶、AJCC分期)患者之间突变率的差异，多因素logistic回归模型分析两种突变分别与甲状腺乳头状癌患者临床特征的相关性。结果 120例甲状腺结节组织病理学诊断为恶性的80例，其中53例(66.25%)患者发生TSH受体基因突变，59例(73.75%)患者发生BRAF V600E突变。单因素分析结果显示，甲状腺结节TSH受体基因突变与甲状腺乳头状癌肿瘤大小、淋巴转移、甲状腺被膜外侵犯、多发病灶、AJCC分期等临床病理特征有关(P1 资料和方法9:10 2017-7-20

    1.1 一般资料 选择2013年5月—2016年10月我院收治的甲状腺结节患者140例，男81例，女59例，平均年龄40.7±16.2岁。患者术前经高分辨率超声检查，术后经病理学检查确诊为甲状腺结节。

    1.2 基因组DNA抽提方法 治疗前，抽取所有甲状腺结节患者外周血5 mL,采用TakaRa基因组提取试剂盒提取外周血基因组DNA,具体步骤参照试剂盒操作说明。使用NaNodrop 2000c测定基因组DNA的浓度，将所有基因组DNA浓度稀释成统一浓度，同时DNA质量要求A260/A280比值在1.8～2.0之间，A260/A230比值>2。

    1.3 TSH受体基因和BRAF V600E突变检测 根据TSH受体基因第8号外显子序列和BRAF V600E基因序列 ......