章云衡，狄春红，罗 燕，谭晓华，杨 磊

    (1.杭州师范大学 公共卫生学院，浙江 杭州310036；2.杭州师范大学附属医院，浙江 杭州 310015)

    ATP结合盒(ATP-binding cassette transporter，ABC)家族介导的多药耐药与生物学体的抗砷功能相关。ABCB1基因，即多药耐药基因(multidrug resistance，MDR1)，ABCC1即多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated protein, MRP1)可以将砷转运到细胞外，降低胞内的砷的浓度，增加细胞对砷的耐受性。人类ABCA1基因定位于 9q31.1，含50个外显子，ABCA1蛋白质全长2 261个氨基酸，我们之前的研究证实ABCA1是又一重要的细胞抗砷基因，与ABCB1、ABCC1协同发挥作用。ABCA1蛋白共12次跨膜，形成6个胞外环和5个胞内环，其中胞外第一、四、六环和胞内第三环较大，而其他各环包含较少的氨基酸。课题组前期的研究构建了多个ABCA1的突变体，并检测其对ABCA1抗砷性的影响。本研究将构建的ABCA1细胞外第843—1 348位氨基酸密码子缺失的突变体表达载体转染至低表达ABCA1的HeLa细胞中，检测HeLa细胞对砷耐受性及细胞内砷蓄积量。

    1 材料与方法

    1.1 细胞与质粒 HeLa细胞、pcDNA3.1/V5-His空载体由本实验室保存。大肠杆菌DH5α为分子克隆的受体菌，保存于本实验室中。野生型ABCA1表达质粒pcDNA3.1/V5-His/ABCA1由德国Schimitz Gerd教授惠赠。ABCA1第843—1 348位氨基酸残基缺失突变体(ABCA1△843-1 348)表达载体pcDNA3.1/V5-His/ABCA1△843-1 348由本实验室构建 ......