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编号:12771925
重组人甲状旁腺素对人骨髓间充质干细胞表达骨形态发生蛋白2的影响(2)
http://www.100md.com 2016年2月5日 中外医学研究 2016年第4期
     目前已知在体外实验中,PTH间歇性给药有利于骨髓间充质干细胞的成骨分化,而连续大剂量给药则抑制其向成骨细胞分化[2-4]。而BMP2是目前已知的最重要的促成骨细胞分化的生长因子之一。本实验通过添加不同PTH浓度及给药时间,检测骨髓间充质干细胞BMP2的表达量,探讨PTH与骨髓间充质干细胞表达BMP2间关系,为进一步研究PTH促骨髓间充质干细胞成骨分化的机制打下基础。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂

    重组人甲状旁腺素1-34氨基酸片段,白色冻干粉,1 mg/支;L-DMEM、维生素C;淋巴细胞分离液;地塞米松;β-甘油磷酸,低糖DMEM培养基及胎牛血清(FBS),碱性磷酸酶测定试剂盒(南京建成生物工程研究所),人BMP2测定试剂盒(Abvona)。

    1.2 骨髓间充质干细胞分离和培养

    采用离心法培养骨髓间充质干细胞。无菌条件下,取无骨代谢疾病骨科手术患者骨髓组织约5 ml。肝素抗凝,等量PBS稀释,按2∶1比例加入淋巴细胞分离液。400 g离心30 min,取中间白膜层,PBS洗涤2遍 ......
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