磷酸肌酸预处理对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究
摘要：目的:研究磷酸肌酸(PCr)预处理糖尿病(DM)大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用。方法：将160只雄性SD大鼠，随机分成8组(D1~D8)，再选取60只大鼠为对照组，随机分成3组进行研究，通过血糖、尿量及饮水量对DM模型进行评估，并对血流动力学参数进行记录，测定心肌高能化合物含量及电竞对心肌与线粒体超微结构进行观察。结果：DM组血糖、饮水量及尿量均增高，体重及血清胰岛素含量均降低，各项与对照组比较，p<0.05，均有显著差异性，有统计学意义。结论：PCr预处理DM心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。
关键词：磷酸肌酸；糖尿病；心肌缺血再灌注损伤
【中图分类号】R255.4 【文献标识码】A 【文章编号】1674-7526(2012)04-0089-01
MIRI是在短时间心肌血供中断，一定时间内血供恢复，原缺血心肌发生与血供恢复前比较，产生更加严重的损伤[1]。因为在心肌细胞在心肌缺血时凋亡数增加，在以后的再灌注时，诱发的炎症反应会使这种结果加重[2]。笔者对PCr预处理DM大鼠MIRI的保护作用进行研究，现报告如下。
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1 资料与方法
1.1 一般资料：选取160只雄性SD大鼠(上海斯莱克实验动物有限公司)，体重量250~300g，平均285.2±8.6g，随机分成8组(D1~D8)，再选取60只正常大鼠为对照组，随机分成3组。SD大鼠高脂饲养28d后，给予链脲佐菌素(STZ,购自美国Sigma公司)50mg/kg腹腔注射，制作DM模型，D1与D2为2周与8周DM假手术组；D3与D4为2周与8周DM心肌缺血再灌注(MIR)组；D5与D6为2周DM+PCr单次及分次预处理组；D7与D8为8周DM+PCr单次及分次预处理组。对照组C1为假手术组，C2为MIR组，C3为MIR+PCr单次及分次预处理组。
1.2 方法：假手术组大鼠开胸不结扎冠脉；大鼠结扎-放松冠脉左前降之；D5及D7组大鼠结扎冠脉前给予PCr1g/kg腹腔注射；D6及D8组大鼠每d给予PCr0.2g/kg腹腔注射，持续5d，其他处理同MIR组。心肌缺血30min再灌注2h后处死大鼠。通过血糖、尿量及饮水量对DM模型进行评估，并对血流动力学参数进行记录，测定心肌高能化合物含量及电竞对心肌与线粒体超微结构进行观察。
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1.3 统计学处理：采用SPSS13.0软件对数据进行统计学处理，计数资料采t检验，计量资料采用χ2检验，以p<0.05，为有显著差异性，提示有统计学意义。
2 结果
DM组血糖、饮水量及尿量均增高，体重及血清胰岛素含量均降低，各项与对照组比较，p<0.05，均有显著差异性，有统计学意义。
心肌缺血30min、再灌注1h、2h时，预处理组LVSP与+dp/dtmax下降幅度与LVEDP升高幅度均小于MIR组幅度波动，相互比较，p<0.05，均有显著差异性，有统计学意义。两种预处理方法对血流力学无显著影响(p>0.05)，无统计学意义。
C2、D3、D4组心肌纤维排列与C1、D1、D2组比较，明显较紊乱、断裂，线粒体肿胀变性及核染色质凝集，相互比较，p<0.05，均有显著差异性，有统计学意义，D4组较C2、D3组损伤严重。C3、D5与D6、D7与D8的心肌纤维、线粒体损伤与C2、D3、D4组比较，明显减轻，相互比较，p<0.05，差别有统计学意义。
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D1、D2组ATP含量低于C1组，C2组ATP含量低于C3组，D2组ATP含量低于D1组，D3组ATP含量低于D5、D6组，D4组ATP含量低于D7、D8组，相互比较，p<0.05，均有显著差异性，有统计学意义。
C3组能荷值高于C2组，D1组能荷值高于D2组，D5、D6组能荷值高于D3组，D8组能荷值高于D4组，相互比较，p<0.05，均有显著差异性，有统计学意义。
C3组PCr的含量高于C2组，D3组PCr的含量高于D4组、低于D5组，D7、D8组PCr的含量高于D4组，D5组PCr的含量高于D6、D7组高于D8组，相互比较，p<0.05，均有显著差异性，有统计学意义。
3 讨论
心肌缺血再灌注常常导致心肌损伤严重加剧，有缺血再灌注损伤产生。PCr预处理可减轻大鼠缺血再灌注损伤并改善肠功能[3]。可能是通过清除氧自由基，使SOD活性增强及脂质过氧化反应减弱，Bcl-2蛋白表达增强与Bax、Caspase-3蛋白表达降低，造成Baal-2/Bax比值升高，从而抑制细胞凋亡。本组试验采用高脂饲养联合STZ注射，复制出DM模型，具有三多一少的典型症状与血糖升高、胰岛素降低等特点；结扎冠脉复制MIR模型。结果显示，PCr预处理可改善正常与DM大鼠MIR过程中的心功能，D1、D2组ATP含量低于C1组，C2组ATP含量低于C3组，D2组ATP含量低于D1组，D3组ATP含量低于D5、D6组，D4组ATP含量低于D7、D8组，C3组能荷值高于C2组，D1组能荷值高于D2组，D5、D6组能荷值高于D3组，D8组能荷值高于D4组，说明PCr可使缺血心肌中的ATP及PCr含量提高，增加能荷值，从而使缺血心肌能量状态改善，通过维持细胞膜与线粒体膜的稳定性，可起到保护心肌作用。单次与分次预处理均可对糖尿病MIRI起到保护作用，但单次预处理可明显增加心肌高能化合物含量[4]。2周DM 大鼠对MIRI的敏感性与正常大鼠比较，未有显著增加，8周则增加显著。综上所诉，PCr预处理DM心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。
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参考文献
[1] 周丽昉,高长斌.磷酸肌酸对大鼠缺血再灌注后心肌损伤的影响[J].中国老年学杂志, 2011,(09) 117-118
[2] 孟祥雁,包晓群,罗媛媛,高长斌. 磷酸肌酸对大鼠缺血再灌注损伤心肌线粒体MDA、SOD和Ca2+表达的影响[J].中国老年学杂志, 2010,(10) 89-91
[3] 李玮,肖雄箭,林建东.磷酸肌酸对脓毒症大鼠心肌能量代谢的影响[J].当代医学,2011,(02) 14-15
[4] 曹能琦.缺血后处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究[D].南京医科大学, 2010 62-64, 百拇医药(王利)
关键词：磷酸肌酸；糖尿病；心肌缺血再灌注损伤
【中图分类号】R255.4 【文献标识码】A 【文章编号】1674-7526(2012)04-0089-01
MIRI是在短时间心肌血供中断，一定时间内血供恢复，原缺血心肌发生与血供恢复前比较，产生更加严重的损伤[1]。因为在心肌细胞在心肌缺血时凋亡数增加，在以后的再灌注时，诱发的炎症反应会使这种结果加重[2]。笔者对PCr预处理DM大鼠MIRI的保护作用进行研究，现报告如下。
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1 资料与方法
1.1 一般资料：选取160只雄性SD大鼠(上海斯莱克实验动物有限公司)，体重量250~300g，平均285.2±8.6g，随机分成8组(D1~D8)，再选取60只正常大鼠为对照组，随机分成3组。SD大鼠高脂饲养28d后，给予链脲佐菌素(STZ,购自美国Sigma公司)50mg/kg腹腔注射，制作DM模型，D1与D2为2周与8周DM假手术组；D3与D4为2周与8周DM心肌缺血再灌注(MIR)组；D5与D6为2周DM+PCr单次及分次预处理组；D7与D8为8周DM+PCr单次及分次预处理组。对照组C1为假手术组，C2为MIR组，C3为MIR+PCr单次及分次预处理组。
1.2 方法：假手术组大鼠开胸不结扎冠脉；大鼠结扎-放松冠脉左前降之；D5及D7组大鼠结扎冠脉前给予PCr1g/kg腹腔注射；D6及D8组大鼠每d给予PCr0.2g/kg腹腔注射，持续5d，其他处理同MIR组。心肌缺血30min再灌注2h后处死大鼠。通过血糖、尿量及饮水量对DM模型进行评估，并对血流动力学参数进行记录，测定心肌高能化合物含量及电竞对心肌与线粒体超微结构进行观察。
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1.3 统计学处理：采用SPSS13.0软件对数据进行统计学处理，计数资料采t检验，计量资料采用χ2检验，以p<0.05，为有显著差异性，提示有统计学意义。
2 结果
DM组血糖、饮水量及尿量均增高，体重及血清胰岛素含量均降低，各项与对照组比较，p<0.05，均有显著差异性，有统计学意义。
心肌缺血30min、再灌注1h、2h时，预处理组LVSP与+dp/dtmax下降幅度与LVEDP升高幅度均小于MIR组幅度波动，相互比较，p<0.05，均有显著差异性，有统计学意义。两种预处理方法对血流力学无显著影响(p>0.05)，无统计学意义。
C2、D3、D4组心肌纤维排列与C1、D1、D2组比较，明显较紊乱、断裂，线粒体肿胀变性及核染色质凝集，相互比较，p<0.05，均有显著差异性，有统计学意义，D4组较C2、D3组损伤严重。C3、D5与D6、D7与D8的心肌纤维、线粒体损伤与C2、D3、D4组比较，明显减轻，相互比较，p<0.05，差别有统计学意义。
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D1、D2组ATP含量低于C1组，C2组ATP含量低于C3组，D2组ATP含量低于D1组，D3组ATP含量低于D5、D6组，D4组ATP含量低于D7、D8组，相互比较，p<0.05，均有显著差异性，有统计学意义。
C3组能荷值高于C2组，D1组能荷值高于D2组，D5、D6组能荷值高于D3组，D8组能荷值高于D4组，相互比较，p<0.05，均有显著差异性，有统计学意义。
C3组PCr的含量高于C2组，D3组PCr的含量高于D4组、低于D5组，D7、D8组PCr的含量高于D4组，D5组PCr的含量高于D6、D7组高于D8组，相互比较，p<0.05，均有显著差异性，有统计学意义。
3 讨论
心肌缺血再灌注常常导致心肌损伤严重加剧，有缺血再灌注损伤产生。PCr预处理可减轻大鼠缺血再灌注损伤并改善肠功能[3]。可能是通过清除氧自由基，使SOD活性增强及脂质过氧化反应减弱，Bcl-2蛋白表达增强与Bax、Caspase-3蛋白表达降低，造成Baal-2/Bax比值升高，从而抑制细胞凋亡。本组试验采用高脂饲养联合STZ注射，复制出DM模型，具有三多一少的典型症状与血糖升高、胰岛素降低等特点；结扎冠脉复制MIR模型。结果显示，PCr预处理可改善正常与DM大鼠MIR过程中的心功能，D1、D2组ATP含量低于C1组，C2组ATP含量低于C3组，D2组ATP含量低于D1组，D3组ATP含量低于D5、D6组，D4组ATP含量低于D7、D8组，C3组能荷值高于C2组，D1组能荷值高于D2组，D5、D6组能荷值高于D3组，D8组能荷值高于D4组，说明PCr可使缺血心肌中的ATP及PCr含量提高，增加能荷值，从而使缺血心肌能量状态改善，通过维持细胞膜与线粒体膜的稳定性，可起到保护心肌作用。单次与分次预处理均可对糖尿病MIRI起到保护作用，但单次预处理可明显增加心肌高能化合物含量[4]。2周DM 大鼠对MIRI的敏感性与正常大鼠比较，未有显著增加，8周则增加显著。综上所诉，PCr预处理DM心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。
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参考文献
[1] 周丽昉,高长斌.磷酸肌酸对大鼠缺血再灌注后心肌损伤的影响[J].中国老年学杂志, 2011,(09) 117-118
[2] 孟祥雁,包晓群,罗媛媛,高长斌. 磷酸肌酸对大鼠缺血再灌注损伤心肌线粒体MDA、SOD和Ca2+表达的影响[J].中国老年学杂志, 2010,(10) 89-91
[3] 李玮,肖雄箭,林建东.磷酸肌酸对脓毒症大鼠心肌能量代谢的影响[J].当代医学,2011,(02) 14-15
[4] 曹能琦.缺血后处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究[D].南京医科大学, 2010 62-64, 百拇医药(王利)