高鹏，周凤蕊，刘俊华，周川

    1.郑州市第六人民医院，河南 郑州450015；2.郑州大学第二附属医院，河南 郑州450000

    坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis，NEC)是临床常见的新生儿急重症，尤其是早产儿、低体质量儿发病率更高，已成为导致新生儿死亡的重要疾病之一[1-3]。NEC以小肠、结肠弥漫性或局部坏死为典型特征，至今尚无有效的治疗手段，探讨其发病机制，寻找有效干预手段对改善NEC预后有重要临床意义。研究表明，除肠道菌群紊乱外，肠道促炎及抗炎因子失衡与NEC发生、发展关系密切[4-5]。随着对中医药研究的深入，发现中药在抗炎、调节机体免疫方面发挥着重要作用。雷公藤是临床常用的活血化瘀、解毒消肿药物，其主要活性成分雷公藤多苷已被证实具有抗炎和免疫调节作用[6-8]。雷公藤多苷常用于治疗溃疡性结肠炎、类风湿性关节炎等炎症性疾病[9-10]，但其对NEC的研究较少。本研究应用新生大鼠人工喂养联合缺氧冷刺激的方法建立NEC模型，观察不同剂量的雷公藤多苷对其肠道菌群的影响，并探讨具体的调控机制，为临床新生儿NEC的治疗提供依据。

    1 材料

    1.1 动物SPF级SD新生大鼠55只，雌雄不限，1～2日龄，体质量5～10 g，由郑州大学实验动物中心提供，许可证号：SCXK(豫)2018-0001。饲养于12 h/12 h明暗交替，24～26℃，相对湿度(55±1)%条件下。实验操作符合动物伦理学，伦理号：2019005703127。

    1.2 药物及试剂雷公藤多苷片(江苏美通制药有限公司，批号：20190320)；雅培婴儿配方奶粉、雅培蛋白粉(美国雅培公司，批号分别为：57713T26、61485C15)；脂肪乳(德国费森尤斯卡比华瑞制药有限公司，批号：20203927)；白细胞介素1β(interleukin-1β，IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα，TNF-α)酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒(美国R＆D公司，批号分别为：VAL601、M600B、ML-Elisa-1421)；BCA蛋白定量分析试剂盒(美国Thermo公司，批号：23209)；兔抗大鼠葡萄糖调节蛋白78(GRP78)单抗、兔抗大鼠激活转录因子6(ATF6)多抗、兔抗大鼠增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)单抗(美国Abcam公司，批号分别为：ab21685、ab203119、ab194533)；山羊抗兔GRP78、ATF6、CHOP单抗(美国Abcam公司 ......