王平，赵澄，吴涛，张香港，卢芳国，吴碧清，吴贤倩，陈丽玄，鲍杰

    1.湖南中医药大学，湖南 长沙 410208；2.贵州中医药大学，贵州 贵阳 550025

    幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，H.pylori)已被证实是慢性胃炎和消化性溃疡的病因之一，且与胃癌的发生密切相关[1]。成功定植于胃黏膜是H.pylori感染的首要条件，而黏附又是定植的关键[2]。鞭毛动力、尿素酶活性和黏附素是H.pylori在胃内得以生存和定植的重要原因，与H.pylori致病性密切相关，成为根治H.pylori感染的重要靶点[3-4]。中医药治疗在改善症状、提高幽门螺杆菌根除率、降低幽门螺杆菌复发率等方面有较大优势[5]。临床研究发现，中药黄芪(Astragali Radix)对H.Pylori相关性胃炎和消化性溃疡的治疗效果显著，但具体机制不清[6]。黄芪甲苷(Astragaloside IV，ASIV)是一种四环三萜类皂苷，为黄芪的主要活性成分，本实验通过观察ASIV对H.pylori尿素酶活性、鞭毛运动功能及定植相关基因表达的影响，初步探讨ASIV抗H.Pylori定植的可能机制，为黄芪及其活性成分的进一步开发利用提供理论和实验支持。

    1 材料

    1.1 菌株H.Pylori ATCC26695菌株由贵州医科大学微生物学教研室惠赠，由课题组保管于贵州中医药大学形态实验室。

    1.2 药物及试剂ASIV(大连美仑生物技术有限公司，批号：MB1955，纯度>98%)；H.Pylori固体培养基、布氏肉汤干粉、脑心浸液肉汤干粉、H.Pylori添加剂(青岛海博生物技术有限公司，批号：HB8646、HB0241、HB8297-1、HB8646a)；DMSO(北京索莱宝科技有限公司，批号：D8370)；无菌脱纤维羊血(常德比克曼生物科技有限公司)；过氧化氢酶试剂、氧化酶试纸片(青岛海博生物技术有限公司，批号：HB8650、HB2100)；尿素酶试纸(珠海市克迪科学技术开发公司，批号：121102)；无菌PBS缓冲液(美国HyClone公司，批号：SH30256.01)；BCA蛋白浓度测定试剂盒(北京索莱宝科技有限公司，批号：PC0020)；细菌总蛋白提取试剂盒(上海贝博生物科技有限公司，批号：BB3123-2)；细菌尿素酶比色法定量检测试剂盒(美国GENMED公司，批号：GMS15022.2)；细菌总RNA提取试剂盒(离心柱型)(北京天根生化科技有限公司，批号：DP430)；cDNA合成试剂盒、NovoStart?SYBR qPCR SuperMix Plus试剂盒(上海近岸蛋白质科技有限公司 ......