井晶，刘梦，郭静，田二斌

    郑州大学第二附属医院，河南 郑州 450003

    卵巢癌是一种高度异质类肿瘤，其发病率位于女性恶性肿瘤第2位，而致死率在女性恶性肿瘤中位居首位[1]。卵巢癌早期无明显痛感和典型症状，不易察觉，因此确诊时往往已为中晚期，癌细胞已转移到腹腔，严重威胁女性健康[2]。化疗技术是中晚期肿瘤治疗的主要手段，以铂类药物为基础的化疗方法在卵巢癌的治疗中普遍使用[3]。虽然该方法可提高患者5年生存率，但是由于卵巢癌复发率高、易耐药，使得治疗效果不明显[4]。据报道，90%的卵巢癌晚期患者因多药耐药死亡[5]。研究表明，初次化疗患者中至少存在20%的患者对铂类化疗药物具有耐药性，而在卵巢癌复发患者中，对该药的耐药率高达70%以上[6]。因此，如何降低肿瘤细胞对化疗药物的耐药性是目前研究的热点和难点。龙胆苦苷提取自龙胆科植物龙胆，具有抗炎镇痛、保肝利胆、健胃等功效[7]。研究表明，龙胆苦苷还有抗肿瘤的作用，可抑制卵巢癌细胞增殖、凋亡和迁移[8]。但是该药物对耐顺铂卵巢癌细胞顺铂化疗敏感性的影响尚未涉及，因此，本研究使用龙胆苦苷处理人卵巢癌细胞株A2780/DDP，研究其对顺铂化疗敏感性的影响，并探讨其机制，为龙胆苦苷在临床卵巢癌治疗中的应用提供理论依据。

    1 材料

    1.1 细胞人卵巢癌细胞株A2780/DDP(上海美轩生物科技有限公司，货号C1015112)，-80℃恒温保存，避免反复冻融。

    1.2 药物与试剂顺铂注射液(江苏豪森药业集团有限公司，批号：181204)；龙胆苦苷(成都德思特生物技术有限公司，纯度≥98%，批号：1808006)。RAMI 1640培养基(美国Gibco公司，批号：20181046)；MTT法细胞增殖分析试剂盒(美国Trevigen公司，批号：1811102)；吉姆萨染色试剂盒(上海歌凡生物科技有限公司，批号：20181016003)；二甲基亚砜(苏州联雄化工科技有限公司，批号：20190516)；4%多聚甲醛(上海远慕生物科技有限公司，批号：201904112)；RNA提取试剂盒(美国赛默飞公司，批号：1904125)；蛋白提取试剂盒(武汉默沙克生物科技有限公司，批号：P1903147)；反转录试剂盒(日本Takara公司，批号：190415)；RT-qPCR染色试剂盒(常州百代生物科技有限公司，批号：1902183)；Bcl-2、p53、XIAP、Survivin、p-p53、β-actin一抗和二抗(美国Aviva Systems Biology公司 ......