杨豪，曾范慧

    驻马店市中心医院，河南 驻马店 463400

    骨质疏松是由于骨量低、骨微结构遭破坏而引发的全身性骨骼疾病。老年人群较为常见，绝经后的女性发病率也较高[1]。随着老龄化日益加重，骨质疏松患者发病率也逐年上升[2]。有文献报道，仅骨质疏松所致髋部骨折患者中1年内因并发症致死率约20%，50%左右患者致残，严重影响患者的生活[3]。目前增强骨质的常见药物有雌激素、降钙素、生长激素等，但是长期使用药物引起的不良反应不容忽视[4]。牛膝具有补肝肾、强筋骨、活血化瘀的功效[5]。牛膝多糖为牛膝的主要成分之一。研究表明，牛膝多糖可促进关节软骨细胞增殖，可应用于骨性关节炎[6]。Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路在骨发育、分化及修复等过程中具有重要调节作用。研究发现，激活Wnt/β-catenin通路可以调节骨代谢，促进骨折愈合[7]。本研究基于Wnt/βcatenin通路探讨牛膝多糖对骨质疏松骨折大鼠骨代谢的调控作用，为临床治疗骨质疏松骨折提供依据。

    1 材料

    1.1 动物清洁级SD雌鼠60只，体质量270～290 g，购自上海吉辉实验动物饲养有限公司，许可证号：SCXK(沪)2019-0001。饲养条件：12 h光照12 h黑暗，温度(25±2)℃，相对湿度40%～60%，自由饮食和进水。伦理批号：ZMDCH201902-03。

    1.2 药物与试剂牛膝多糖(纯度≥98%，兰州沃特莱斯生物科技有限公司，批号：130415)；尼尔雌醇(安徽圣鹰药业有限公司，批号：190412)。生理盐水(辽宁民康制药有限公司，批号：20181204)；RNA提取试剂盒、反转录试剂盒(北京全式金生物技术有限公司，批号：180316、180520)；细胞裂解液(上海李记生物科技有限公司，批号：20180416003)；制胶试剂盒(北京德元国际科技有限公司，批号：20180912A)；电化学发光(electrochemi luminescence，ECL)试剂盒(上海炎熙生物科技有限公司，批号：181114C)；实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR)预混体系(SYBR GreenⅠ)(上海联迈生物工程有限公司，货号：RT0416135208)；碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)、骨钙素(bone gla protein，BGP)、Ⅰ型前胶原氨基端前肽(type Iprocollagen propeptide ......