冠心病心绞痛血瘀证四亚型与血小板活性相关性探讨
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【摘要】目的 探讨血小板活性(GMP-140)与冠心病心绞痛血瘀证四亚型的相关性。方法 对符合诊断标准的112例受试者分别检测其GMP-140指标。所有数据均用SPSS 13.0统计分析软件处理，P<0.05被认为有统计学意义，P<0.01被认为有显著统计学意义。结果冠心病心绞痛血瘀证GMP-140明显高于冠心病心绞痛非血瘀证组和健康人对照组，各亚型比较，为痰浊血瘀>气滞血瘀>气虚血瘀>阴虚血瘀。结论 冠心病心绞痛血瘀证不同亚型与GMP-140有密切的相关性，血小板的活化是CHD心绞痛心血瘀阻证形成的主要机制之一，且提示实证组重于虚证组。
【关键词】冠心病心绞痛血瘀证；亚型；GMP-140；相关性
中医学对冠心病心绞痛血瘀证的辨证分型颇多，临床上比较常见的辨证分型有气滞血瘀、气虚血瘀、痰浊血瘀、阴虚血瘀，本实验探讨血小板活性(GMP-140)与冠心病心绞痛血瘀证常见的四亚型的相关性，现将实验方法及结果报道如下：
1临床资料
1.1受试对象
受试对象主要来自于湖南中医药大学附属一医院、附属二医院、及湖南省中医药研究院附属医院心内科冠心病心绞痛病人，随机抽取符合诊断标准的冠心病心绞痛病人作为观察对象，对所获取的病例按本文采用的中医证候辨证标准进行诊断，将符合纳入标准的病例作为研究对象。
纳入本研究的满足各项条件的病例共有112例，分为4组，另设健康对照组、冠心病非血瘀证组者，其中健康对照组(简称A组)30例、冠心病非血瘀证组者(简称B组)30例、冠心病血瘀证气滞亚型(简称C组)25例、气虚亚型(简称D组)28例、痰浊亚型(简称E组)30例、阴虚亚型(简称F组)29例。
1.2诊断标准
1.2.1冠心病心绞痛西医诊断标准
冠心病心绞痛西医诊断标准参照国际心脏学会及WHO制定的“缺血性心脏的命名及诊断标准” [1]。
1.2.2 冠心病心绞痛中医诊断标准
按照1995年《中华人民共和国中医药行业标准·中医病证诊断疗效标准》的辨证分型标准拟定。主症: 胸闷心痛/痛如针刺/心悸气短；兼症: 面色晦暗/口唇青紫/爪甲发青；舌象:舌质紫暗/舌有瘀斑；脉象:涩/结代；主症1项，为冠心病心绞痛；主症1项十兼症2项十舌脉1项，为冠心病心绞痛血瘀证。
1.2.3 冠心病心绞痛血瘀证各亚型辩证标准
按照1995年《中医病证诊断疗效标准》[2]的辨证分型标准，参照中医诊断学第六版教材[3]，由导师组织咨询相关专家拟定，见表1。
表1各亚型分级量化表
临床上，冠心病心绞痛血瘀证出现单一亚型很少，一般夹杂多种亚型，本课题采取以哪种亚型所占分数较多则属于该亚型为原则。
1.2.4 纳入标准
同时符合冠心病心绞痛诊断标准和冠心病心绞痛血瘀证诊断标准；诊断为稳定型心绞痛；年龄在55岁-75岁者；在检查前15天内没有参加其他临床研究者；伴随病史主要以糖尿病和高血压为主。
1.2.5 排除标准
意识不清，不能表达主观不适应症状；合并肝、肾、消化、造血系统等严重原发性疾病者及精神病患者；诊断为不稳定型心绞痛。
2临床实验
2.1方法
静脉采血，置于含有1/10体积0.109mol/L枸缘酸钠抗疑液的试管中，3000rpm离心10 min，收集上层液(血浆，黄色)。-70℃保存；采用发色底物法(Assay)检测。操作步骤参见说明书。
2.2数据处理：
首先根据标准品A492对GMP-140标准品浓度(ng/ml)6组数据(取对数)在SPSS13.0 统计软件上得出线数方程：LgY=1.1926×LgX-1.5419，相关系数：R=0.9597，待测样品GMP-140浓度(ng/ml)可从公式中上计算出。
2.3统计学分析
所有数据均以均数±标准差(X±S)表示,组间比较用方差分析,所有统计学处理均在SPSS13.0 统计软件上完成。
3结果与讨论
3.1结果 见表1，GMP-140水平从高到低依次为E组>C组>D组>F组>B组>A组，与A、E组相比，其余各组差异均有显著统计学意义(P<0.01)；与B组相比，除F组外其余各组差异均有显著统计学意义(P<0.01)；与C组相比，除D组外其余各组差异均有显著统计学意义(P<0.01)；与D组相比，除C、F组外其余各组差异均有统计学意义(P<0.05)。
表1 各组GMP-140水平比较表(X±S)
注：与A组相比，*P<0.01；与B组相比，▲P<0.01；与C 组相比，△P<0.01，△△P<0.05；与D组相比，★P<0.01；与E组相比，☆P<0.01。
3.2讨论GMP-140，又称P-选择素、CD62P或PAI-EM，是一种分子量为140KD的糖蛋白，富含有半胱氨酸，高度糖化的整合蛋白质，属于细胞黏附分子中的选择素家族，贮存于静息血小板a颗粒膜上和内皮细胞Weibel Palade小体中[4]。
GMP-140在血小板活化时从a颗粒转移到膜上，其含量的改变在一定程度上反映了体内血小板活化、释放及破坏程度，其特异性与敏感性较其他表面标志蛋白为佳，被认为是目前所知反映血小板活化与释放反应最特异的标志物[5]。同时，研究者结果显示，在血栓性疾病发病时GMP-140显著升高，而且由于血小板膜上GMP-140表达增多，导致血浆中VWF及凝血因子Ⅶ升高，AT-Ⅲ下降，PAI-1升高，纤溶活性下降，因而造成一种血栓前高凝状态[6] 。因此GMP-140显著升高可作为血栓性疾病监测和血栓前状态评价的有效指标[7]。
各种致动脉粥样硬化危险因素如炎性因子、氧化脂质、自由基等首先引起EC功能失调，血浆中或血小板、内皮细胞上P-选择素表达增加，促进白细胞与血小板和内皮细胞的黏附，参与血管内局部炎症反应和AS形成[8]。目前研究证明冠心病AS斑块P选择素表达增加，是早期病理变化和斑块活力的标志物，与AS的严重程度相关[9]。
国内研究表明，血小板活化是CHD心血瘀阻证形成的主要机制之一，CHD心血瘀阻时反应血小板活化状态的特异性指标如GMP-140水平。由于血小板活化，易于激活，发生聚集，聚集体不断增大附着于血管壁，造成血管腔逐步狭窄，血流缓慢瘀滞，从而引起“血脉凝泣”、“血行失度”、“心脉瘀阻”，因此是导致CHD血瘀病理改变的主要因素之一[10]。
本研究结果表明，CHD心绞痛血瘀证组GMP-140明显高于CHD心绞痛非血瘀证组和健康人对照组，与国内有关的研究结果基本一致.亦表明血小板的活化系CHD心绞痛心血瘀阻证形成的主要机制之一。CHD心绞痛血瘀证各亚型比较，为痰浊血瘀>气滞血瘀>气虚血瘀>阴虚血瘀，提示实证组重于虚证组。
参考文献
[1]国际心脏病学会和协会及WHO命名标准化联合专题组.缺血性心脏命名及诊断标准[S].中华心血管病杂志，1981，9(1)：75-76
[2]国家中医药管理局，中医病症诊断疗效标准[S] ......
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