肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶的表型调查
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【摘要】目的从表型水平了解我院肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶的流行状况，为医院感染防控和规范碳青霉烯类抗生素的使用提供实验室依据。方法收集我院2009年9月至2011年3月临床分离的多重耐药肺炎克雷伯菌44株，用改良Hodge试验进行产碳青霉烯酶的表型确证，并对其药敏结果、流行病学特点进行分析。结果44株多重耐药肺炎克雷伯菌对22种常用抗菌药物除亚胺培南外，耐药率均在40%以上，亚胺培南的耐药率为11.4%，其中有4株改良Hodge试验阳性， 提示产碳青酶烯酶，2株来自烧伤科的创面分泌物，2株来自ICU的呼吸道标本。结论我院出现了产碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌，在重点科室存在局部流行的潜在威胁，需进一步从分子生物学水平确定耐药基因的类型和同源性，目前应加强院感防控。
【关键词】肺炎克雷伯菌；碳青霉烯酶；Hodge试验；表型；
Klebsiella pneumoniae carbapenemase producing phenotypic survey
【Abstract】Objective phenotypic level from our hospital Klebsiella pneumoniae carbapenemase producing the prevalence, prevention and control of hospital infection and regulate the use of carbapenems to provide laboratory evidence. Methods in our hospital from September 2009 to March 2011 multi-drug resistant clinical isolates of Klebsiella pneumoniae 44 strains, with the modified Hodge test to produce carbapenemase phenotype confirmed, and the drug susceptibility results, epidemiological characteristics were analyzed. Results 44 strains of multidrug resistant Klebsiella pneumoniae in 22 commonly used antibiotics except imipenem, the resistance rate of 40%, and imipenem resistance was 11.4%, of which 4 improved Hodge test positive, suggesting that enzyme production of carbon-ene blue enzyme, two from the burn unit of the wound secretions, two from respiratory specimens of ICU. Conclusion The emergence of our hospital carbapenemase producing Klebsiella pneumoniae, endemic presence in key sections of the potential threat, the level of molecular biology to be further from the resistance genes to determine the type and homology, the current Court should be strengthened flu prevention and control.
碳青霉烯类抗生素在临床上主要用于治疗高产AmpC酶和ESBLs的多重耐药肠杆菌科细菌，而且在肠杆菌科细菌中极少有耐药出现，但随着碳青霉烯类抗生素在临床上使用频率的增加。从我院以往的监测数据显示，肠杆菌科细菌一直以来对亚胺培南的敏感性为100%，但2009年9月我们首次检出了对碳青霉烯类敏感性下降的肺炎克雷伯菌，随后陆续检出更多的菌株。许多研究表明，一种由质粒编码的碳青霉烯酶──KPC酶，是肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类耐药的主要原因，为了解我院肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶的流行状况，同时也为医院感染防控和规范碳青霉烯类抗生素的使用提供实验室依据，现做以下调查：
1材料与方法
1.1材料
1.1.1菌株来源收集我院2009年9月至2011年3月临床分离的多重耐药(对三种以上不同类别抗菌药物耐药)肺炎克雷伯菌44株，其中来自呼吸道标本22株、外科分泌物18株、尿液3株、血液1株。
1.1.2主要仪器与试剂MicroScan AutoScan-4微生物鉴定和药敏分析系统及其配套阴性复合板NC31；厄他培南(10μg)纸片购自英国Oxoid公司；MH平板购自江门凯林贸易有限公司；质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603、Hodge试验阳性菌株(潘尼变形杆菌，2009年卫生部质评菌株0909号)。
1.2方法
1.2.1细菌鉴定及药敏试验按MicroScan AutoScan4微生物鉴定和药敏分析系统及其配套阴性复合板NC31对细菌进行鉴定和药敏(MIC值)检测。
1.2.2改良Hodge试验10倍稀释的0.5麦氏浊度大肠埃希菌(ATCC25922)菌液，均匀涂布在MH平板上，中央贴厄他培南(10μg)纸片，用接种环挑取待测菌自纸片外缘向平板边缘划线，同时用ATCC700603肺炎克雷伯菌做阴性对照，用已确证Hodge试验阳性的菌株做阳性对照。35℃孵育16-18小时后观察结果，结果判断：以划线与厄他培南抑菌圈交叉处细菌有加强生长趋势为阳性。
2结果
2.1药敏试验结果44株多重耐药肺炎克雷伯菌对临床22种常用抗菌药物均呈现较高的耐药率，除亚胺培南(11.4%)外，其余均大于40%，见图1。
2.2产碳青霉烯酶表型结果对44株肺炎克雷伯菌进行改良Hodge试验，有4株划线与厄他培南抑菌圈交叉处细菌有加强生长趋势，为Hodge试验阳性，提示产碳青霉烯酶，其中2株分离自烧伤科病人的创面分泌物，2株来自ICU的呼吸道标本。4株菌对亚胺培南显示中介或耐药。
3讨论
碳青霉烯酶是指能够明显水解亚胺培南或美罗培南的一类β-内酰胺酶，包括Ambler 分子分类的A、B、D三类酶。KPC型碳青霉烯酶是目前引起肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素敏感性下降的原因之一 ......
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