自拟骨伤方I号消肿镇痛及成骨作用的实验研究(2)
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2.2热板法实验[4]
2.2.1镇痛实验筛选合格小鼠：接通电源热板测痛仪,温度调节至55℃。取雌性小鼠若干,将小鼠依次放入仪器内，小鼠从放在热板上至出现舔后足所需时间作为该鼠的痛阈值。凡舔后足时间少于5 s或多于30 s或跳跃者弃之不用，筛选合格小鼠共60只。
2.2.2实验动物随机分组:将随机筛选合格的雌性小鼠分为空白对照组,正骨方高、中、低剂量组,每组10只。
2.2.3给药及测试:以上各组分别依次给予蒸馏水，0.12、0.06、0.03 g/ml自拟骨伤方I号,灌胃给药,剂量20 mL/kg。给药3 d，末次给药后30 min开始测各小鼠痛阈值，如给药后痛阈值超过60 s,则停止测试按60 s。将各组给药后的痛阈值与空白组进行比较。痛阈提高百分率=(用药后痛反应时间-用药前痛反应时间用药前痛反应时间)×100%。
2.2.4实验结果: 自拟骨伤方I号各剂量组小鼠痛阈值与空白组比较均有所延长,其中自拟骨伤方I号高剂量的作用最强(P<0.01)，结果见表2。
表2自拟骨伤方I号对热板法小鼠痛阈值的影响( ±s,n=12)
组别剂量/(g/kg)给药后痛阈值/s
空白组-13.53±7.8
骨伤方I号高剂量组3.625.62±4.5**
骨伤方I号中剂量组1.821.78±5.8*
骨伤方I号低剂量组0.918.92±8.5
注：与空白组比较，*表示与空白组有显著性差异，P<0.05。**表示与空白组有极显著差异，P<0.01。
2.3自拟骨伤方I号对家兔实验性骨折模型的成骨作用分析[5]
2.3.1骨折模型空白的建立及给药取家兔40只，适应性饲养1周后，随机分为4组，每组10只，分别为空白组(等体积蒸馏水)，0.12、0.06、0.03 g/ml自拟骨伤方I号, 剂量20 mL/kg,各组家兔均用3.5%水合氯醛麻醉，两侧前肢剪毛，消毒，无菌条件下用牙科钻在两侧桡骨中段交界处横形钻成宽约为3mm，深入骨髓腔造成骨损伤，缝合皮肤，术后次日开始灌胃给药，连续28d。
2.3.2方法观测指标分别于给药后第14，28d取各组家兔10只，截取两侧桡骨，包括骨损伤部位及其上、下正常骨质，在X光下测定骨矿物密度，观察骨折处愈合情况。颈动脉采血，测血小板聚集率。
2.3.3 结果：自拟骨伤方I号各剂量组的骨密度增加与空白组比较均有所延长，其中自拟骨伤方I号高剂量的作用最强(P<0.05)，表明自拟骨伤方有加快骨矿沉积速率，提高骨密度，促进家兔骨损伤部位愈合的作用，结果见表3。
表3自拟骨伤方I号对家兔骨折模型骨密度的影响
( ±s,g•cm-3,n=7)
组别剂量/(g/kg)骨密度(14d)骨密度(28d)
空白组-0.177±0.0380.267±0.042
骨伤方I号高剂量组3.60.261±0.043*0.364±0.061**
骨伤方I号中剂量组1.80.225±0.058*0.291±0.024
骨伤方I号低剂量组0.90.205±0.0270.275±0.056
注：与空白组比较，*表示与空白组有显著性差异，P<0.05。**表示与空白组有极显著差异，P<0.01。
自拟骨伤方I号对家兔骨折模型血液流变学的影响给药14d时，自拟骨伤方I号中、高剂量组能抑制血小板聚集，与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。给药28d后，与模型组比较，自拟骨伤方I号低、高剂量组也有显著性差异(P<0.05)。具体结果见表4。
表4自拟骨伤方I号对家兔骨折模型血小板聚集率的影响
( ±s,%,n=7)
组别剂量/(g/kg)血小板聚集率(14d)血小板聚集率(28d)
空白组-78.52±12.6290.54±8.22
骨伤方I号高剂量组3.650.63±17.55*72.62±9.62*
骨伤方I号中剂量组1.860.56±11.82*80.52±12.21
骨伤方I号低剂量组0.972.23±11.1082.51±7.54
注：与空白组比较，*表示与空白组有显著性差异，P<0.05。
3讨论
祖国医学认为,骨折后血离筋脉,瘀积不散,使经络受阻,影响骨折愈合, 愈合的过程就是瘀去、新生、骨合的过程。治宜活血化瘀、续筋接骨、补骨健肌[6]。
我们自拟骨伤方中，金银花、连翘清热解毒，田七活血化瘀、消肿止痛，羚羊骨、赤芍清热凉血，薏苡仁渗湿利水，防风解表止痛，蝉蜕疏风热，熄风解痉。合方共奏清热解毒、活血化瘀、利水消肿之效。现代药理学证明，以清热解毒类药物为主的复方，具有一定程度的抗菌抗病毒功效，对内毒素具有解毒、灭活的作用，还能有效降低创伤后应激反应中的炎性介质。
现代医学表明影响骨折愈合最根本的因素是局部的血液供应。加快血液循环有利于离子交换与小梁骨改建和再吸收，把更多的钙动员出来。一切影响血液供应的因素，都会直接影响骨折愈合过程。
通过动物试验研究,我们发现自拟骨伤方I号具有显著的消肿及镇痛作用 ......
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