许智华 刘海霞

    (山西省儿童医院耳鼻喉科，山西太原 030013)

    COCH基因是人类发现的第1个伴前庭功能障碍的常染色体显性遗传非综合征型耳聋基因，定位于14号染色体长臂14q12～13，在耳蜗和前庭组织中有高度表达，其编码的Cochlin蛋白是内耳细胞外基质的主要成分。

    COCH基因突变可致患者出现渐进性感音神经性耳聋、前庭功能障碍症状，诊断为人类常染色体显性遗传非综合征性耳聋疾病(Non-syndrom ic autosomal dom inant sensofineural deafness，DFNA)DFNA9[1]。

    M icroRNAs(m iRNAs)是一种小的内源性非编码RNA分子，大约由21～25个核苷酸组成。这些小的m iRNA通常靶向一个或者多个mRNA，通过翻译水平的抑制或断裂靶标mRNAs而调节基因的表达[2]。

    谢菲尔德大学沃尔特·马科蒂博士等通过对小白鼠的研究发现，m iR-96与哺乳动物耳蜗发育密切相关，m iR-96突变会导致人和小鼠渐进性失聪。研究人员认为，m iR-96会调节耳蜗毛细胞生理发育进程，也会影响耳蜗毛细胞的形态，对哺乳动物的听觉系统至关重要[3-5]。根据目前的研究基础，笔者通过荧光定量PCR来检测m iR-96是否会调节COCH基因的表达情况，或者两者之间存在某种关联。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料与试剂

    B95-8 (绒猴EBV 转化的白细胞)购自上海中科院细胞库；RPM I1640培养基与胎牛血清(FBS)为PAA产品；脂质体转染试剂Lipofectam ineTM 2000为Invitrogen公司产品；一步法RT-PCR扩增试剂盒购自美国Promega公司；m iRNA m im ics和m iRNA inhibitor购自广州锐博公司 ......