TLR4对MHV-3诱导的C3H/He小鼠病毒性肝炎转归的影响(2)
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参见附件。
1.2 病毒株
MHV-3为本研究室保存病毒株，在DBT细胞系空斑纯化后于鼠17CL1细胞系繁殖培养，鼠L2细胞系蚀斑纯化和滴度测定。本研究所用MHV-3滴度为1.0×106 PFU/mL。
1.3 动物模型的建立
随机取C3H/HeJ及C3H/HeN小鼠各30只，腹腔注射 100μL MHV-3(0.1 PFU/μL)，另取C3H/HeJ及C3H/HeN小鼠各10只，注射100μL 无菌PBS作为对照。注射后的小鼠，继续饲养于IVC系统。在12/12h昼夜循环、恒温恒湿条件下自由摄取食水。
1.4 小鼠生存状态观察
每天观察小鼠生理状况及死亡情况，并对每只存活小鼠皮毛、呼吸及身体颤抖三项特征进行评分[12]。正常状态记为5分，状态明显异常记为1分，综合评分满分为15分，见表1。计算每组存活小鼠的平均得分，已死亡小鼠不参与计分。两组小鼠均观察至感染后40d。
1.5 统计学分析
应用Sigma Plot12.0统计软件包进行资料分析，临床症状评分采用重复测量数据的方差分析进行比较，生存率的比较采用Kaplan-Meier生存分析，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 一般情况
C3H/HeJ及C3H/HeN小鼠均于感染后3d开始一般状态变差，精神萎靡，毛发无光泽，感染2周内，小鼠症状明显，可见毛发竖直粘连，呼吸加快，颤抖拱背，肢体无力，行动迟缓，并出现死亡，临床症状综合评分均出现明显下降，感染2周后临床症状开始缓解，小鼠状态均明显好转，感染3周后，存活小鼠状态基本恢复，综合评分接近正常水平，见图1。注射PBS的对照小鼠，均未出现临床症状。
采用重复测量数据的方差分析进行统计，小鼠品系因素对临床症状评分不起作用，临床评分有随时间变化的趋势，且时间因素的作用随小鼠品系而不同，见表2 ......
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