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编号:13122740
裂褶菌子实体中多糖及蛋白质含量的测定(2)
http://www.100md.com 2014年12月1日 孙鹏珍 刘月 王大可 李爱欣 王淑敏
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    参见附件。

     采用考马斯亮蓝法测定裂褶菌子实体中蛋白质的含量。

    2.2.1 标准蛋白质溶液的配制 精密称定20mg牛血清蛋白,置于10mL的容量瓶中,用生理盐水定容至刻度,即得2mg/mL标准蛋白质溶液。

    2.2.2 供试品溶液的制备 精密称取子实体粉末5.0082g,加8倍量生理盐水浸渍24h,滤液透析浓缩,定容至10mL量瓶中,即得供试品溶液。

    2.2.3 方法学考察

    2.2.3.1 线性关系考察 精密加入标准蛋白溶液0.04、0.06、0.08、0.10、0.12、0.14、0.16mL于试管中,分别加生理盐水至0.2mL,再加入考马斯亮蓝试剂10mL,混匀,5min后于595nm波长下测定其吸光度值。以浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,得回归方程:Y=20.0830X+0.1451,r=0.9997,蛋白质在0.0078~0.0312mg/mL 范内呈良好的线性关系。

    2.2.3.2 精密度试验 取供试品溶液,按照2.2.2项下制备,移取0.2mL溶液,依法在595nm波长下测定其吸光度,重复6次,其RSD值为0.5142%,表明仪器精密度良好。

    2.2.3.3 稳定性试验 取供试品溶液,按照2.2.2项下制备,移取0.2mL溶液,按照测定法每间隔5min测定其在595nm波长下吸光度 ......

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